请问内参β-actin中的内参具体是指什么意思?描述有问题。抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-Actin做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴:-内参,。
内参的表达量与目的基因的表达量有关吗 没有关系,内参的表达量理论上来说是比较恒定的,一般为看家基因。目的基因的表达则不是那么恒定。如果内参基因对目的基因的有一定的调控作用就另说了
RT-PCR是,内参是什么时候加入,作用是什么?谢谢 你说的应该是realtimepcr吧,注意rt其实是逆转录reversetranscription的缩写,和realtime一定要分开来。常说的qpcr,qrt-pcr,都是通过实时(realtime)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值但是呢,由于之前rna提取、反转等步骤,各个步骤存在不同的效率,ct值并无法真实反应样品中模版的绝对量,因此,需要一个内参来做为参考。比方说,a基因的ct值,在a样品中是18,在b样品中是20,由于ab样品存在rna质量等等一系列不同,你无法直接就判断这个基因在a样品中的表达量是b样品的4倍。这时候,我们需要一个内参,假如内参ct值在a样品中是14,而在b样品中是15。由于内参的稳定性,在不同样品中被认为是表达量一致的,因此,a基因的在ab样品之间的-δδct值是1,也就是表达量为2倍的关系。这里,我们可以知道内参的作用,即通过测量内参,可以在后面分析过程中将不同样品的起始量均一化。内参需要选择在不同样品中有稳定表达量的基因,这就是为什么内参经常选择看家基因的原因。以小鼠为例,常用的内参有actingapdhhprt等等。当然,现在的很多观点认为这些基因在不同组织中丰度也不同,例如gapdh,在线粒体含量高的组织中丰度高,很多人认为用基因组dna做。
看家基因作用是什么?实时荧光定量PCR技术中为什么要用它? 看家基因的意思是稳定表达2113的一种基因5261所以他的作用就是用来做4102内参比如在做PCR的时候,初始的模板量的不同直1653接导致扩增后的量的差别,那么看家基因的作用就出现了,要在看家基因的表达水平相同的情况下,比较其他基因的表达是否有升高或降低。
看家基因是什么啊?(housekeeping gene) 是一类典型的结构基因,维护基本细胞功能所必需的基因,是在所有有机体的细胞中表达。其中一部分基因序列比较保守。他们的命名其实是在1976年发现特殊的tRNA和rRNA的时候产生的,本意亦不可考究。