碱性蛋白酶测定酶活力时为什么要先要固定化 这个不一定要固定化吧,游离的也可以测啊!酶活力的常用测定方法? 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>原发布者:马晓晓碱性蛋2113白酶及各种蛋白酶活力5261测定方法及测定有感因长期测定4102碱性蛋白酶酶活力与角蛋白酶1653活力与胶原酶活力和弹性蛋白酶活力,碱性蛋白酶活力测定还好,因有国家标准,测定按照国标来便可大大减少误差。其余酶活力测定过程中因无统一标准且底物差异大,导致长期酶活力测定的混乱,各种酶活力测定方法与各种试剂添加,最后实际测定的酶活力只能仅作参考。以下是各种蛋白酶活力测定方法及标曲绘制:碱性蛋白酶测定方法根据国标GB/T23527-2009附录B蛋白酶活力测定福林法以下是方法碱性蛋白酶的测定方法参考GB/T23527-2009附录B中福林酚法进行,即1个酶活力单位(U/mL)定义为1mL酶液在40℃、pH=10.5条件下反应1min水解酪蛋白产生1μg酪氨酸所需要的酶量,主要步骤如下。2.2.6.1标准曲线的绘制(1)L-酪氨酸标准溶液:按表2-6配制。管号表2-6L-酪氨酸标准溶液配置表Table2-6L-Tyrosinestandardsolutionform酪氨酸标准溶液的浓度/(μg/mL)取100μg/mL酪氨酸标准溶液的体积/(mL)取水的体积/(mL)001102203304405500101928374655(2)分别取上述溶液各1.00mL,各加0.4mol/L碳酸钠溶液5.0mL,福林试剂使用液1.碱性蛋白酶活力的测定中为什么要把反应条件控制在pH为11,温度为40? 因为这种条件下的碱性蛋白酶活性最好测定蛋白酶活力实验 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>原发布者:临泽潇洒哥测定蛋白酶活力实2113验一、实验5261目的1.加深了解酶活力的概念。41022.学习掌握测定蛋白酶活1653力的方法。二、实验原理酶活力指酶催化某一特定反应的能力。其大小可用在一定条件下酶催化反应进行一定时间后,反应体系中底物的减少量或产物的生成量来表示。酶活力单位是表示酶活力大小的重要指标。本实验规定酶活力单位(U)为一定条件下每分钟分解1μg酪氨酸所需的酶量。实验选用枯草杆菌蛋白酶水解酪蛋白产生酪氨酸的反应体系。产物酪氨酸在碱性条件下与Folin-酚试剂反应生成蓝色化合物,该蓝色化合物在680nm处有最大光吸收,其吸光值与酪氨酸含量呈正比。因此通过测定一定条件下产物酪氨酸的含量变化,可计算出蛋白酶的活力。三、仪器和试剂仪器:恒温水浴锅、分光光度计、试管及试管架、干燥滤纸、玻璃漏斗。原料枯草杆菌蛋白酶:称取1g枯草杆菌蛋白酶粉,用少量0.02mol/L,pH7.5磷酸缓冲液溶解并定容至100mL,震荡15分钟,使充分溶解,干纱布过滤,取滤液冰箱备用。使用时视酶活力高低用缓冲液适当稀释。试剂1.Folin-酚试剂:在2L磨口回流瓶中加入钨酸钠(Na2WoO4.2H2O)100g,钼酸钠(Na2WoO4.2H2O)25g,蒸馏水碱性蛋白酶活力测定实验中最后加入福林酚的原因是什么 碱性蛋白酶活力测定实验中最后加入福林酚的原因是什么 与蛋白酶水解生成的酪氨酸反应生成有色物质,在680nm处检测吸光度,其与酪氨酸含量成正比碱性蛋白酶活力测定实验中最后加入福林酚的原因是什么 与蛋白酶水解生成的酪氨酸反应生成有色物质,在680nm处检测吸光度,其与酪氨酸含量成正比碱性蛋白酶活力测定,空白样与待测样加三氯醋酸时间不同为什么 化学反应不一样的碱性蛋白酶活力的测定中为什么要把反应条件控制在pH为11,温度为40? 碱性蛋白酶活力的测定中为什么要把反应条件控制在pH为11,温度为40?因为这种条件下的碱性蛋白酶活性最好胰蛋白酶活力测定的原理是什么? 我的血脂比较高,医生说这样的话会有血栓的可能性很大,建议我进行胰蛋白酶活力测定,想咨询一下,胰蛋白酶活力测定的原理是什么?
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