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大肠菌群计数实验原理 大肠菌群MPN计数法

2020-10-17知识97

食品中卫生 检验大肠菌群测定 什么是大肠菌群 它的数指什么 一、大肠菌群介绍大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致,其定义为:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌.一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等.大肠菌群分布较广,在温血动物粪便和自然界广泛存在.调查研究表明,大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因.粪便中多以典型大肠杆菌为主,而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多.大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的,主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染.大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小.粪便是人类肠道排泄物,其中有健康人粪便,也有肠道患者或带菌者的粪便,所以粪便内除一般正常细菌外,同时也会有一些肠道致病菌存在(如沙门氏菌、志贺氏菌等),因而食品中有粪便污染,则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性,潜伏着食物中毒和流行病的威胁,必须看作对。

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大肠菌群平板计数法,懂得进. 先放肉汤,不用事先灭菌要用棉塞121℃15分钟接种棒蘸取到肉汤里涮一涮注意每次都要灭菌接种棒最后一个问题要说具体点,希望你满意。简洁明了。

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滤膜法做水中总大肠菌群,计数问题的疑问 实验六十一 滤膜法测定水中大肠菌群一、目的要求学习使用滤膜法测定水中大肠菌群。二、基本原理滤膜法是采用滤膜过滤器过滤水样,使其中的细菌截留在滤膜上,然后将滤膜放在适当的培养基上进行培养,大肠菌群可直接在膜上生长,从而可直接计数。所用滤膜是一种多孔硝化纤维膜或乙酸纤维膜,其孔径约0.45μm。三、器材伊红美蓝琼脂平板或远藤氏琼脂平板,乳糖蛋白胨发酵管内有倒置小套管),灭菌水,河水或湖水;灭菌过滤器(漏斗、基座、带有孔橡皮塞的抽滤瓶分别灭菌,可用高压蒸汽灭菌),镊子,夹钳,真空泵,滤膜,烧杯等。四、操作步骤1.滤膜灭菌将滤膜放入装有蒸馏水的烧杯中,加热煮沸15分钟,共煮沸三次,前两次煮沸后换水洗涤2—3次再煮,以洗去滤膜上残留的溶剂。2.滤膜过滤器装置用无菌手续将已灭菌的过滤器基座、滤膜、漏斗和抽滤瓶按图ⅪⅤ-2装配好,其中滤膜用灭菌镊子(浸在95%酒精内,用时通过火焰灭菌)移至过滤器的基座上。其他可直接用手或夹钳操作,但不要碰到伸入抽滤瓶的橡皮塞部分,以免染菌。3.将抽滤瓶接上真空泵。4.加水样过滤直径35mm的滤膜,所过滤的水量以培养后长出的菌落数不图ⅪⅤ-2滤膜过滤器装置多于50个为适宜。。

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食品中大肠菌群的检验,有哪些需要注意的实验步骤 食品微生物学检验 大肠菌群计数:大肠菌群平板计数法(GB 4789.3-2010)一 试剂和仪器煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB肉汤)结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)恒温培养箱自动稀释仪均质器振荡器二 样品处理固体样品应在无菌条件下充分粉碎。本次演示以乳粉为例,取密封状态良好的试样,备用待测。三 检测过程实验前准备进入无菌操作室前应更换无菌实验服,戴帽子、口罩、无菌手套。进入无菌操作室后,首先用镊子夹取适量酒精棉全面擦拭双手,然后才能进行实验操作。酒精易燃,因此在擦拭双手的过程中应离开酒精灯火焰一定距离,防止出现危险,待手上的酒精挥发完全后,再进行实验操作。样品的稀释取一洁净无菌均质袋于自动稀释仪上,用酒精棉充分擦拭样品袋,将剪刀置于酒精灯外焰上充分灼烧,小心剪开样品袋。将称样勺于酒精灯外焰灼烧片刻,准确称取25g样品于无菌均质袋中。用酒精灯外焰灼烧注水口片刻,在盛有样品的均质袋中注入225mL无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液。取下均质袋,将均质袋放入拍击式均质器中,用均质器拍打1min~2min,制成1:10的样品匀液。注意:样品匀液的pH值应在6.5~7.5之间,必要时可用1 mol/L无菌氢氧化钠或1mol/L无菌盐酸溶液调节。均质完毕。

我是一个化验新手谁知道大肠菌群和菌落总数怎么检验? 一、菌落总数Aerobic Bacterial Count1 范围本规范规定了菌落总数的检验方法。2 定义本规范采用下列定义菌落总数(aerobic bacterial count)是指化妆品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等),1g(1mL)检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性菌落总数。测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度,是对样品进行卫生学总评价的综合依据。3 仪器和设备3.1 三角瓶。3.2 量筒。3.3 pH计或精密pH试纸。3.4 高压灭茵器。3.5 试管。3.6 平皿:直径9cm。3.7 刻度吸管:10mL、2mL、1mL。3.8 酒精灯。3.9 恒温培养箱。3.10 放大镜。4 培养基和试剂4.1 生理盐水:成分:氯化钠 8.5g蒸馏水加至 1000 mL溶解后,分装到加玻璃珠的三角瓶内,每瓶90mL,103.43kPa(15 lb)20min高压灭菌。4.2 卵磷脂、吐温80—营养琼脂培养基4.2.1 成分:蛋白胨 20g牛肉膏 3g氯化钠 5g琼脂 15g卵磷脂 1g吐温80 7g蒸馏水 1000mL4.2.2 制法:先将卵磷脂加到少量蒸馏水中,加热溶解,加入吐温80,将其他成分(除琼脂外)加到其余的蒸馏水中,溶解。加入已溶解的卵磷脂、吐温80,混匀,调pH值为 7。

大肠菌群检测方法 GB 4789.3-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》中的规定操作步骤:1、乳糖发酵试验:样品稀释后,选择三个稀释度,每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。

#食品污染#酒精灯#大肠菌群

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