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平板接种仪 无菌实验中同组样品中个别长菌怎么处理

2020-10-16知识31

医疗器械的无菌检查法 关于中国药典中的一次性医疗器械的无菌检查,我们想用直接接种法,有知道的希望详细说明一下,万分感谢 一次性无菌导尿管,还有探头,都是硅胶的,用普通营养琼脂培养就。

平板接种仪 无菌实验中同组样品中个别长菌怎么处理

无菌实验中同组样品中个别长菌怎么处理 食品微生物学检验 大肠菌群计数:大肠菌群平板计数法(GB 4789.3-2010)一 试剂和仪器煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB肉汤)结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)恒温培养箱自动稀释仪均质器振荡器二 样品处理固体样品应在无菌条件下充分粉碎。本次演示以乳粉为例,取密封状态良好的试样,备用待测。三 检测过程实验前准备进入无菌操作室前应更换无菌实验服,戴帽子、口罩、无菌手套。进入无菌操作室后,首先用镊子夹取适量酒精棉全面擦拭双手,然后才能进行实验操作。酒精易燃,因此在擦拭双手的过程中应离开酒精灯火焰一定距离,防止出现危险,待手上的酒精挥发完全后,再进行实验操作。样品的稀释取一洁净无菌均质袋于自动稀释仪上,用酒精棉充分擦拭样品袋,将剪刀置于酒精灯外焰上充分灼烧,小心剪开样品袋。将称样勺于酒精灯外焰灼烧片刻,准确称取25g样品于无菌均质袋中。用酒精灯外焰灼烧注水口片刻,在盛有样品的均质袋中注入225mL无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液。取下均质袋,将均质袋放入拍击式均质器中,用均质器拍打1min~2min,制成1:10的样品匀液。注意:样品匀液的pH值应在6.5~7.5之间,必要时可用1 mol/L无菌氢氧化钠或1mol/L无菌盐酸溶液调节。均质完毕。

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细菌总数的计算方法? 细菌总数计数的研究已有很多,目前国标规定的方法为平板计数法,其检验方法是:在玻璃平皿内,接种一毫升水样或稀释水样于加热液化的营养琼脂培养基中,冷却凝固后在37°C培养24小时,培养基上的菌落数或乘以水样的稀释倍数即为细菌总数。有的国家把培养温度定为35°C或其他温度,也有把培养时间定为48小时的。这种方法精度高,但耗时长,难以满足实际工作需要。为了简化检测程序、缩短检测时间,国内外学者进行了大量的快速检测方法的研究,提出了阻抗检测法、Simplate TM全平器计数法、微菌落技术、纸片法等检测方法,取得了一定的成果,但检测时间仍在4 h以上。本研究在分析了已有研究成果的基础上,提出了在滤膜上染色后,直接计数的细菌总数检测方法,具体步骤为:用集菌仪进行细菌收集→在膜上进行染色→在油镜下计数→按公式计算出菌液浓度。实验结果表明,该方法与传统的平板培养法无显著性差异,检测时间约1 h,是一种快速的细菌总数检测方法。

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琼脂稀释法试验接种细菌应如何进行操作? 可以采用多点接种仪操作。接种前琼脂的表面必须干燥,接种时应先接种不含抗 菌药的质控平板,以检查接种菌的生长性和纯度;随后从抗菌药浓度最低的平板开始依次 接种不同。

大肠杆菌的检测方法 多管发酵法。多管发酵法是一种检测水体中大肠杆菌的传统方法,这种方法是在44.5℃的含有荧光底物的培养基上连续培养24h,而后能产生分解荧光底物—葡萄糖醛酸酶,从而释放出荧光产物,进而使培养基在紫外光照射下产生特征荧光。此方法可被用来对原样品中的菌落数作统计学估计。在单料或双料乳糖胆盐发酵管内发酵,分离培养试验,利用伊红美蓝培养皿分离,接着是在乳糖发酵管中进行二次发酵,最后通过芽孢染色、革兰氏染色、显微镜观察等来完成。多管发酵法对试验条件要求不高,成本低,但是检测时间较长,容易受其他条件干扰,进而影响到测定结果的精确度。扩展资料:注意事项:1、检样时注意无菌操作。2、稀释时采用的稀释液可以用磷酸盐缓冲液或生理盐水,接种时可采用九管法,设置三个梯度,分别为0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL,每一个稀释度的试管应充分混匀。3、每次实验需要有阴性对照。4、使用小倒管培养基配制时,为排净气泡,灭菌时不要把试管的盖子盖的太紧,灭菌后注意观察一下倒管中的气体是否排完全、5、高压灭菌后等高压灭菌锅的压力表达到0,取出培养基放到冰箱冷却,效果会比较好。参考资料来源:-大肠杆菌测试片参考资料来源:。

#细菌培养#平板菌落计数法#无菌技术#微生物发酵#冻粉

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