谁能告诉我一下反向液相色谱的工作原理吗？它与正向的有什么区别吗？ 高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法（正相与反相）、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。1．液固色谱法 使用固体吸附剂，被。
反相与正相色谱法有什么区别？ 正相和反相是根据固定相和流动相的极性差异定义的。正相是固定相极性大，反相是液相极性大。反相色谱比较正相色谱能够检出的物质更多，速度更快，各物质之间的锋间距更大。反相离子对色谱：使用含有离子基的反离子组成中性离子对，用于分离离子型或可离子化化合物。分离非极性特别强的化合物可用非水反相技术。正是由于反相技术的“多变性”，使反相色谱的分离对象几乎遍及所有类型的化合物。
请问C18柱是正相还是反相色谱柱？CN柱呢？ C18柱是反相 色谱柱，CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。。
正相色谱柱与反相色谱柱的区别 色谱柱的安装：1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积，进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线，同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前，确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳的连接效果，应尽量使用与色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头，如原来的接头长期匹配其他类型的色谱柱，建议在连接新色谱柱前应检查匹配情况，避免造成色谱柱的损坏或因色谱柱不匹配造成的漏液。3、使用PEEK 材料的通用接头，只需用手拧紧不需要特定扳手，使用压力为5000psi；使用温度不得超过100℃。流动相平衡：1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤，消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱，以免柱性能损坏（添加5％的有机溶剂冲洗色谱柱，同时可以达到对缓冲盐清洗的作用。。
睛的氰基水解条件是什么？如何控制？氰基可以在碱性条件下进行醇解吗？具体条件是些什么？ 水解和醇解均可在酸或碱的催化下进行，水解时先生成酰胺，再生成羧酸。醇解时，如绝对无水则生成亚胺酯（酯中的氧被亚胺基取代，酸催时得其盐），有水生成酯。酸催化时，可。
反相色谱的概念 反相液相色谱柱效高、分离能力强、保留机理清楚，是液相色谱分离模式中使用最为广泛的一种，对于生物大分子、蛋白质及酶的分离分析，反相液相色谱正受到越来越多的关．反相色语法是以表面非极性载体为固定相，面以比固定相极性强的溶剂为流动相的—种液相色谱分离模式．反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团，基于样品中的不同组分和疏水基团之间疏水作用的不同而分离．在生物大分子分离中，多采用离子强度较低的酸件水溶液，添加一定量乙腈、异内醇或甲醇等与水互溶的有机溶剂作流动相．普通的反相色谱固定相和孔径大于300？的硅胶键合烷基固定相应用较为普遍，聚合物基质的反相色谱固定相也有较多应用．反相色谱中样品的保留值主要由固定相比表面积、键合相种类和浓度决定，保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增大，对于非极性化合物通常遵循以下规则：(弱)非键合硅胶氰基(TMS)苯基≈C18(强)．溶质保留值与固定相表面积成正比，普通载体(80？的表面积约为250m2/g，而300？孔径载体的比表面积约为60m2/g。当其他条件相同时，溶质在300？孔径(低表面积)色谱柱上的保留值大约为80？孔径色谱柱上保留值的1/4(60：250)，小孔隙柱如高保留的C18柱或石墨碳柱。
