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盐析法提取DNA原理 目标产物提取 盐析沉淀法

2020-10-11知识12

请问各位朋友,用盐析法提取蛋白质为什么得不到沉淀? 请查看操作步骤是否正确。溶液pH值越接近蛋白的等电点,蛋白质越溶液沉淀。br>;盐析法是在中药水提液中,加入无机盐至一定浓度,或达饱和状态,可使某些成分在水中。

盐析法沉淀蛋白质的原理 1 中性盐沉淀(盐析法)? 在溶液中加入中性盐使生物大分子沉淀析出的过程称为“盐析”。除了蛋白质和酶以外,多肽、多糖和核酸等都可以用盐析法进行沉淀分离。? 盐析法应用最广的还是在蛋白质领域,已有八十多年的历史,其突出的优点是:? ①成本低,不需要特别昂贵的设备。? ②操作简单、安全。? ③对许多生物活性物质具有稳定作用。? ⑴ 中性盐沉淀蛋白质的基本原理? 蛋白质和酶均易溶于水,因为该分子的-COOH、-NH2和-OH都是亲水基团,这些基团与极性水分子相互作用形成水化层,包围于蛋白质分子周围形成1nm~100nm颗粒的亲水胶体,削弱了蛋白质分子之间的作用力,蛋白质分子表面极性基团越多,水化层越厚,蛋白质分子与溶剂分子之间的亲和力越大,因而溶解度也越大。亲水胶体在水中的稳定因素有两个:即电荷和水膜。因为中性盐的亲水性大于蛋白质和酶分子的亲水性,所以加入大量中性盐后,夺走了水分子,破坏了水膜,暴露出疏水区域,同时又中和了电荷,破坏了亲水胶体,蛋白质分子即形成沉淀。盐析示意图如下页“图 4”所示。? ⑵ 中性盐的选择? 常用的中性盐中最重要的是(NH4)2SO4,因为它与其他常用盐类相比有十分突出的优点:? 1)溶解度。

请问各位朋友,用盐析法提取蛋白质为什么得不到沉淀? 请查看操作步骤是否正确。溶液pH值越接近蛋白的等电点,蛋白质越溶液沉淀。盐析法是在中药水提液中,加入无机盐至一定浓度,或达饱和状态,可使某些成分在水中溶解度降低,从而与水溶性大的杂质分离。常作盐析的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。例如自黄藤中提取掌叶防己碱,自三颗针中提取小檗碱在生产上都是用氯化钠或硫酸铵盐析制备。有些成分如原白头翁素、麻黄碱、苦参碱等水溶性较大,在提取时,亦往往先在水提取液中加入一定量的食盐,再用有机溶剂提取。盐析(salting out)定义盐析向蛋白质溶液中加入高浓度的中性盐,以破坏蛋白质的胶体性质,使蛋白质的溶解度降低而从溶液中析出的现象称为盐析。如利用盐析法结晶肌红蛋白。分段盐析由于不同的蛋白质其溶解度与等电点不同,沉淀时所需的pH值与离子强度也不相同,改变盐的浓度与溶液的pH值,可将混合液中的蛋白质分批盐析分开,这种分离蛋白质的方法称为分段盐析法(fractional saltingout)。如半饱和硫酸铵可沉淀血浆球蛋白,饱和硫酸铵则可沉淀包括血浆清蛋白在内的全部蛋白质。盐析中常用的中性盐硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等,其中以硫酸铵最为常用。盐析的原理:破坏了蛋白质在。

蛋白质沉淀法原理 原理32313133353236313431303231363533e59b9ee7ad9431333366303666:蛋白质通过盐析的办法沉淀的原理是降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出。蛋白质分子聚集而从溶液中析出的现象,称为蛋白质的沉淀。由于水化层和双电层的存在,蛋白质溶液是一种稳定的胶体溶液。如果向蛋白质溶液中加入某种电解质,以破坏其颗粒表面的双电层或调节溶液的pH,使其达到等电点,蛋白质颗粒因失去电荷变得不稳定而将沉淀析出。蛋白沉淀法是毒物分析过程中对生物样品进行前处理的一种常用方式。对于富 含蛋白质的检材,在进行分离、提取时要将 大量干扰测定的蛋白质沉淀除去,使待测毒 物仍留存于溶液中。操作时一般要先将检材组织磨碎,然后再加入蛋白沉淀剂进行蛋白质沉淀,组织中的蛋白质与沉淀剂形成疏松的絮状沉淀物,而毒物则留在溶液中。扩展资料:有机溶剂易使蛋白质或酶变性,常采用降低温度的方法进行有效控制,而且有机溶剂使用量大,溶剂的使用及回收;储存都比较困难或 麻烦。盐析法:盐析法简单方便,可用于蛋白质抗原的粗提、丙种 球蛋白的提取、蛋白质的浓缩等。盐析法提纯的抗原浓度不高,只用于抗原的初步纯化。金属离子沉淀法纯度高,太耗电,沉淀效果很。

盐析法沉淀蛋白质时,为什么需要将ph值调到等电点附近? 1。你说的现象叫等电点沉淀法.蛋白质是带电荷的,有的带正电,有的带负电,因此蛋白质溶液能够稳定存在地原因之一是由于蛋白质分子或其他溶液中成分因为带相同电荷尔相互排斥,不会凝聚或絮凝.每种蛋白质都有等电点,在此pH值条件下,蛋白质不带电荷.因此破坏了原来蛋白质溶液中由于带电荷互相排斥而稳定溶解的状态.因此,此时的蛋白质溶解度最低,或者不溶解,因而会沉淀。2。而盐析是不同的概念。盐析沉淀蛋白质方法有两种解释(1)盐在水溶解度高于蛋白质,因此有大量盐在水中饱和时,蛋白质被挤出不再溶解,因而沉淀。(2)蛋白质空间结构中有疏水集团和亲水集团,在水中溶解时多数是亲水集团在结构外围。加入硫酸铵等物质后,蛋白质结构发生变化,疏水集团暴露在外面,因而不溶于水而沉淀下来。

植物蛋白质的提取方法基本上有这几种:盐析法、有机溶剂法和等电点法。1、盐析法原理:盐析法是指在药物溶液中加入大量的无机盐,使某些高分子物质的溶解度降低沉淀析出,。

盐析法提取DNA原理 DNA在盐溶液的溶解度有一个最低点,利用盐析法使DNA在此浓度盐溶液的溶解度最低从而沉淀出来。另一个是Na+可以中和DNA分子间的负电荷,使之失去排斥力,沉降

盐析的原理

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