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核酸电泳制胶槽 酶切后的质粒和基因组DNA有何不同,为什么

2020-10-11知识10

总DNA电泳拖尾严重是什么原因 1.电压过大,根据电泳槽设置合适的电压;2.缓冲溶液离子浓度过高,调整盐浓度在0.1mol/L以下;3.梳子插得过深,样品从胶板下部通过,梳子底部与胶槽应隔1-2mm(限于水平电泳);4.上样量过多,稀释DNA样品浓度或者减少上样量;5.酶切不完全,使用活性酶重新酶切;6.DNA发生了降解,重新提取DNA,并且加入DNase的抑制剂或者足够量的蛋白质的变性剂。

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用琼脂糖凝胶电泳分析核酸(DNA和RNA)有哪些影响因素?核酸分子是两性解离分子,在高于其等电点的电泳缓冲液中,其碱基不解离,而磷酸基团全部解离,核酸分子因而带负电荷。

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求助:琼脂糖各浓度对应的片段大小 琼脂糖各浓度对应的片段大小一般都会选择1%琼脂糖凝胶,90-120V电压都没有问题,如果要分离片段的话,片段相差不大建议调低电压,增加琼脂糖凝胶浓度,跑胶时尽zd量让溴酚蓝跑的越低越好,只要回不把想要的片段跑出去就好.本人尝试过2%琼脂糖凝胶,40V,跑了近三个小时啊,分开了相差约50bp的两个片段.目的产物大小80BP的片段,你可以用2.0%的琼脂糖答凝胶进行电泳,琼脂糖以及TAE的量的多少,首先与你跑得样品的个数有关,因为你样品的个数决定了你胶槽的体积,胶槽的体积决定了你的TAE的量,决定了琼脂糖的量,比如说你胶槽的体积是20ml,那么你要配2.0%的胶,就需要20ml的TAE和0.4g的琼脂糖.

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#蛋白电泳#琼脂糖#电泳#dna#健康

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