聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理 聚丙烯酰胺凝胶电泳是根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白，蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小，电荷因素可以忽视。
水煮法提取DNA 的详细过程 水煮法提取DNA【试剂】2113缓冲液和溶液：用于筛5261选质粒的抗生素；氯4102霉素（34mg/ml）；选1653用：乙醇；异丙醇(PH8.0)酶和缓冲液：溶菌酶（10mg/ml）；限制性内切核酸酶凝胶：琼脂糖凝胶【实验操作过程】1、将500ml 培养物的细菌沉淀物重悬于用冰预冷的10mlSTET【（0.1mol/L NaCl10mmol/LTris·Cl（pH8.0）1mmol/L EDTA（pH 8.0）】中。将悬液移入50ml锥瓶中。2、加入1ml新配制的溶菌酶溶液[10mg/ml，沉淀于10mmol/LTris.Cl（pH8.0）]。如溶液的pH值低于0.8溶菌酶不能有效地发挥作用。3、用一个夹子把锥瓶放在酒精灯的明火上加热，直至液体恰好开始沸腾，不停地摇晃锥瓶。4、立即把瓶浸入装有沸水的大烧杯（2L）中，将瓶放在沸水中，时间恰为40s。5、将瓶浸入用冰预冷的水中5min，使之冷却。6、将粘稠状内容物从瓶中转移到超离心管，于4℃以30000rpm离心30min。原有的细菌物生长得越密，应越难将粘稠状裂解物转移到离心管中。必要时，可用长刀片和剪刀将裂解物剪成大小适于操作的大团块，或抽入10ml注射器的针筒中使之部分剪切。从用氯霉素处理的细菌培养物中分离质粒DNA时，一般不会出现这样的问题。如果细菌碎片没能形成紧密的团块，可以以35000。
多糖的纯化方法与哪些 ctab即十六烷基2113三甲基溴化铵，是5261一种阳离子去污剂，具有从低离4102子强度的溶液中沉淀核酸和1653酸性多聚糖的特性，在这种条件下，蛋白质和中性多聚糖仍留在溶液里，在高离子强度的溶液里，ctab与蛋白质和大多数酸性多聚糖以外的多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸。因此，ctab可以用于从大量产生粘多糖的有机体如植物以及某些革兰氏阴性菌（包括e.coli的某些株）中制备纯化dna去垢剂(表面活性剂)是一类即具有亲水基又具有疏水基的物质，一般具有乳化、分散、和增溶作用，可分阴离子、阳离子和中性去垢剂等多种类型，中性去垢剂在蛋白提取钟应用的较多。a．中性去垢剂又称非离子表面活性剂，对蛋白质的变性作用影响较少，宜于蛋白质或酶提取之用。一般市售中性去垢剂有聚乙二醇类，如peg200；多元醇类表面活性剂，如山梨醇、司盘类和吐温类；聚氧乙烯脂肪醇醚，如苄泽类、平平加类；聚氧乙烯烷基苯酚醚，如igepalco、乳化剂op、triton、pluronic(用作消泡剂、润湿剂、增溶剂)、泡敌。中性去垢剂作用后可通过sephadexlh-50柱除去；也可直接上deae-sephadex柱层析分离目的蛋白，不必先除去去垢剂。b．阴离子去垢剂常见的有十二烷基硫酸钠和十二烷基璜酸。
化学试剂的保质期是多久 没问题的，可以用，绝对没事，我就是专门经营化学试剂的，一般来说10年之内是不会有事儿的，不过也有少许试剂是有保质期的，不过你说的SDS没事，放心吧
为什么能在细菌破碎后的细菌提取液中分离到质粒DNA 首先要知道，质粒是 共价，闭合，环状的DNA（cccDNA）。以常用的碱裂解法为例：当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒的cccDNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，而其他形式存在的DNA则会依然以絮状形式存在；离心时质粒DNA留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状，离心时可沉淀下来。
RNA的提取方法 1、酚抽提法：先2113用蛋酶K、SDS破碎5261细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高4102速离心后取1653上清，所得DNA大小为100-150kb2、甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。3、玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。4、异丙醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积异丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在异丙醇中可溶状态）5、表面活性剂快速制备法：用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。6、加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。7、碱变性快速制备：先用NaOH作用20分钟，再加HCI中和，离心后取上清，含少量DNA。扩展资料：DNA提取原则：1、保证核酸一级结构的完整性；2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度；4、其他核酸分子，如RNA，也应尽量去除。参考资料来源：—DNA提取
请问各位专家和专业人士，有机物（蛋白质、氨基酸等）是否能够带电？ 有些官能团会带电，分子化合物都是电中性的，整体不带电，如果能在溶液中发生电离，或者被质子化，则可以带电，比如氨基酸在不同PH值下可能带正电，负电，或呈中性。有机化合物也有很多是离子化合物，在溶液中可以完全电离，不过这时也就谈不上“整体”的概念了，正负离子都只是原化合物的一部分。溶剂的极性对溶质极性有一定影响，极性分子有诱导作用，不过也只是让电荷分布变得更不均匀，而不是让本身不带电的粒子变成带电粒子。分子化合物都是电中性的，整体不带电，如果能在溶液中发生电离，或者被质子化，则可以带电，比如氨基酸在不同PH值下可能带正电，负电，或呈中性。有机化合物也有很多是离子化合物，在溶液中可以完全电离，不过这时也就谈不上“整体”的概念了，正负离子都只是原化合物的一部分。溶剂的极性对溶质极性有一定影响，极性分子有诱导作用，不过也只是让电荷分布变得更不均匀，而不是让本身不带电的粒子变成带电粒子。希望对你有帮助
