氨基酸自动分析仪测定蛋白质中氨基酸组成的原理? 采用经典的阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法,对蛋白质水解液及各种游离氨基酸的组分含量进行分析。仪器基本结构同普通HPLC相似,但针对氨基酸分析进行了细节优化(例如氮气保护、惰性管路、在线脱气、洗脱梯度及柱温梯度控制等等)通常细分为两种系统:蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸分析系统(锂盐系统),利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸锂进行梯度洗脱。其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸,速度较快,基线平直度好;锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸,速度较慢,基线一般不如钠盐系统好。分析效果:从目前已知的氨基酸分析方法比较来看,除灵敏度(即最低检测限)比HPLC柱前衍生方法稍低以外(HPLC:;氨基酸分析仪:),其他如分离度、重现性、操作简便性、运行成本等方面,都优于其他分析方法。
氨基酸分析仪的工作原理是什么? 测定原理是利用样品各种氨基酸组分的结构不同、酸碱性、极性及分子大小不同,在阳离子交换柱上将它们分离,采用不同pH值离子浓度的缓冲液将各氨基酸组分依次洗脱下来,再逐个以另一流路的茚三酮试剂混合,然后共同流至螺旋反应管中,于一定温度下(通常为115~120℃)进行显色反应,形成在570nm有最大吸收的蓝紫色产物。其中的羟脯氨酸与茚三酮反应生成黄色产物,其最大吸收在440nm。
全自动氨基酸分析仪的操作方法
氨基酸分析仪的工作原理是什么? 不同的氨基酸结构不同,可通过红外光谱,核磁共振氢谱等方法识别各个酸特定结构,江苏高二化学里有.
氨基酸分析仪的优缺点? 优点 1.分析可以再设备普通的实验室里进行2.能够分析大量的样品。因为通过仔细的计划,好几批试样可以同时分析以及为分析做好准备3.原始数据能够容易的处理以供在计算机中进一步求值4.检测极限也从最初的u mol,级提高到p mol 级5.氨基酸不用柱前衍生,直接上样进行分析,操作步骤简单,故是迄今氨基酸定性、定量分析中应用最广泛的方法之一。柱后衍生试剂除茚三酮外,还有可用荧光检测的邻苯二甲醛,使检测灵敏度得以提高,已达5-10 mol缺点:(1)由于仪器结构复杂,造成价格昂贵;(2)离子交换树脂易压缩,流动相流速的加快不与压力的增加成比例,故测定时间相对较长;(3)氨基酸经离子交换柱分离,在柱后与水合茚三酮衍生剂混合进行反应,势必造成柱后扩散比较大,峰形变宽,分辨率降低;(4)有些柱后衍生剂如邻苯二甲醛虽能用灵敏的荧光检测,但不能与亚氨基反应,故不能检测脯氨酸。