用紫外可见分光光度法测定苯甲酸 紫外-可见分光光度法测定苯甲酸离解常数pKa 一、实验目的 1.掌握测定不同pH条件下的苯甲酸的吸光度并通过计算公式求算出它的离解常数的原理和方法。2.熟悉用紫外-可见分光。
紫外_可见分光光度法，用吸收系数法定量，公式是什么？ A=ECL C=A/ELA为吸收度；2113T为透光率；E为吸收系数，采用的5261表示方法是（E1％1cm），其物理意4102义为当溶液浓度为16531%（g/ml），液层厚度为1cm时的吸收度数值；C为100ml溶液中所含被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g；L为液层厚度，cm。紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。原理可见光、紫外线照射某些物质，主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收，而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择。
归纳总结紫外可见分光光度计法测定时实验条件如何获得 测试的液体ph值和离子浓度不宜过高尽量的稀释一下必须使用相同的比色杯测试空白液和样品，否则浓度差异太大；换算系数和样品浓度单位选择一致；不能采用窗口磨损的比色杯；样品的体积必须达到比色杯要求的最小体积等多个操作事项。
紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同：（1）紫外分光光度计量程为200nm~600nm间，其中包括部分可见光。（2）可见分光光度计量程为320nm-1100nm，能满足不同物质的测试。。
紫外分光光度法测定蛋白质含量实验报告 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：midanshen1紫外分光光度法测定蛋白质含量一、实验目的1.学习紫外光度法测定蛋白质含量的原理；2.掌握紫外分光光度法测蛋白质含量的实验技术。二、实验原理1.测蛋白质含量的方法主要有：①测参数法：折射率、相对密度、紫外吸收等；②基于化学反应：定氮法、双缩脲法、Folin―酚试剂法等。本实验采用紫外分光光度法。2.蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环中含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，其最大吸收峰位于280nm附近（不同蛋白质略有不同）。在最大吸收波长处，吸光度与蛋白质溶液的浓度服从朗伯―比尔定律。利用紫外吸收法测蛋白质含量的准确度较差，原因有二：①对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质，有一定误差，故该法适于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质；②样品中含有的嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质，会出现较大干扰。三、仪器与试剂TU―1901紫外可见分光光度计、标准蛋白质溶液3.00mg·mL-1、0.9%NaCl溶液、试样蛋白质溶液。10mL比色管、1cm石英比色皿、吸量管。四、实验步骤1.绘制吸收曲线用吸量管吸取2mL3.00mg·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中，用0.9%NaCl。
