紫外分光光度法测定蛋白质含量实验报告 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：midanshen1紫外分光光度法测定蛋白质含量一、实验目的1.学习紫外光度法测定蛋白质含量的原理；2.掌握紫外分光光度法测蛋白质含量的实验技术。二、实验原理1.测蛋白质含量的方法主要有：①测参数法：折射率、相对密度、紫外吸收等；②基于化学反应：定氮法、双缩脲法、Folin―酚试剂法等。本实验采用紫外分光光度法。2.蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环中含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，其最大吸收峰位于280nm附近（不同蛋白质略有不同）。在最大吸收波长处，吸光度与蛋白质溶液的浓度服从朗伯―比尔定律。利用紫外吸收法测蛋白质含量的准确度较差，原因有二：①对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质，有一定误差，故该法适于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质；②样品中含有的嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质，会出现较大干扰。三、仪器与试剂TU―1901紫外可见分光光度计、标准蛋白质溶液3.00mg·mL-1、0.9%NaCl溶液、试样蛋白质溶液。10mL比色管、1cm石英比色皿、吸量管。四、实验步骤1.绘制吸收曲线用吸量管吸取2mL3.00mg·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中，用0.9%NaCl。
简述紫外分光光度法测定硝酸盐氮的原理，为什么要在两个波长测定吸光度
简述紫外分光光度法测定硝酸盐氮的原理，为什么要在两个波长测定吸光度 第一个问题说明：在双波长测定中，背景干扰在220nm（测定波长）处的a（吸光度）值是275nm处a（吸光度）值得2倍。
分光光度法的实验原理是什么 实验原理：物质与光作用，具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。由于不同的物质其分子结构不同，对不同波长光的吸收能力也不同，因此具有特征结构的结构集团，存在选择吸收特性的最大实收波长，形成最大吸收峰，而产生特有的吸收光谱。即使是相同的物质由于其含量不同，对光的吸收程度也不同。分光光度法利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质的存在（定性分析），或利用物质对一定波长光的吸收程度来测定物质含量（定量分析）。扩展资e799bee5baa6e78988e69d8331333431356130料：分光光度法测量方法1、标准管法将待测溶液与已知浓度的标准溶液在相同条件下分别测定A值，然后按下式求得待测溶液中物质的含量。2、标准曲线法先配制一系列浓度由小到大的标准溶液，分别测定出它们的A值，以A值为横坐标，浓度为纵坐标，作标准曲线（A~c工作曲线），可以求出标准曲线的回归方程。在测定待测溶液时，操作条件应与制作标准曲线时相同，以待测液的A值从标准曲线上查出（得到）该样品的相应浓度。3、吸光系数法当某物质溶液的浓度为1mol/L，厚度为1cm时，溶液对某波长的吸光度称为。
1.不是所有的吸光光度分析中都以试剂空白做参比溶液，一般是：(1)高吸光度法。光电检测器未受光时，其透光度为零，光通过—个比试样溶液稍稀的参比溶液后照到光电检测器上，调其透光度(T)为100％，然后测定试样溶液的吸光度。此法适用于高含量测定。(2)低吸光度法。先用空白溶液调透光度为100％，然后用一个比试样溶液稍浓的参比溶液，调节透光度为零，再测定试样溶液的吸光度。此法适用于痕量物质的测定。(3)双参比法。选择两个组分相同而浓度不同的溶液作参考溶液(试样溶液浓度应介于两溶液浓度之间)，调节仪器，使浓度较大的参比溶液的透光度为零，而浓度较小的参比溶液的透光度为100％，然后测定试样溶液的吸光度。3、邻二氮菲分光光度法直接测二价铁；全铁—先用三氧化锡将三价铁还原成二价铁，然后加入氯化高汞以氧化过量的三氧化锡，而后按二价铁的方法测就行了
紫外分光光度法测定水中硝酸盐氮为什么会出现负值 亚硝酸盐要？酸性条件（PH=1.8±0.3）才能转变？紫红色？用？光光度？检测？前提条件？根据《水？废水监测？析？（第四版）》？鉴定亚硝酸盐？使亚硝酸盐与？氨基苯磺酸先重氮化？再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐？称盐酸？
最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：记忆_染成画紫外分光光度计的使用原理和方法紫外-可见分光光度法(ultraviolet-visiblespectrophotometry，UV-VIS)1定义：它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析及结构分析，所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。2分类：按所吸收光的波长区域不同：分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。3、紫外-可见分光光度法的特点：（1)其仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快；（与其它光谱分析方法相比）（2）灵敏度高；（3）选择性好；（4）精密度和准确度较高；（5）用途广泛。1.紫外-可见吸收光谱1.物质对光的选择性吸收物质对光的吸收是选择性的，利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是光谱法的基础。通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。在吸收曲线中，通常选用最大吸收波长λmax进行物质含量的测定。2.有机化合物的紫外-可见吸收光谱2.1有机化合物的电子跃迁与紫外-可见吸收光谱有关的电子有三种，即。
简述紫外分光光度法测定水中硝盐氮的原理。 参考答案：利用硝酸根离子在220nm波长处的吸收而定量测定硝酸盐氮。溶解的有机物在220nm处也会有吸收，而硝酸根离大275nm处没有吸收。因此。在275nm处作另一次测量，以校正。
水质检测中，紫外分光光度法测定硝酸盐氮时为什么要减去2倍于275nm波长的吸光度 第一个问题说明：在双波长测定中，背景干扰在220nm（测定波长）处的A（吸光度）值是275nm处A（吸光度）值得2倍。
