ZKX's LAB

求助!薄层层析拖尾现象的真实原因? 胶回收拖尾

2020-10-06知识9

琼脂糖凝胶电泳中回收DNA 根据你扩增的产物情况选择合适分辨率的凝胶浓度,比如:如果你的条带离引物二聚体很远,且比较单一,那可用1%~1.5%的胶即可,可稍微制厚一点,方便点样;如果你的条带只有一两百即离引物二聚体很紧或者非目标条带很多,那你需要浓度稍大一点的胶(3%~5%),电泳时间长一点,这样可使你的目的条带与非目的条带分开,方便切胶.胶制好后即可点样,一般会使用宽一点的梳子可使上样量加大,提高回收浓度.点完样后即可开始电泳,电泳结束后,在紫外光仪下条带可显示出来,用薄的锋利的刀片快速将目标条带切下,切胶时要注意:尽量把目标条带切下,尽量包含较少的琼脂糖胶,并切忌将非目的条带切下,还要注意尽量让紫外线照射时间短(因为紫外照射会发生核苷酸变异,产生TT二聚体).目标条带切下后,可使用专门的琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(很多公司都有),按照试剂盒的说明书即可回收其中的DNA.祝顺利。

求助!薄层层析拖尾现象的真实原因? 胶回收拖尾

DNA琼脂糖凝胶电泳出现拖尾的原因是什么? 做出来结果是这样的。从右到左依次是marker、5ul样、10ul样、20ug样和最后一个做错的10ul。第一次做几乎…

求助!薄层层析拖尾现象的真实原因? 胶回收拖尾

琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾? 看里的答案里提到PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退…

求助!薄层层析拖尾现象的真实原因? 胶回收拖尾

关于genomic DNA电泳拖尾现象 图2是样品有少量降解,并且有RNA污染的.你的顶端有清晰条带说明降解较少,底端较亮说明RNA污染严重.你说一共有800ug,指的是你提的DNA吗,那么你是如何定量的,还有,你的样品是用来干什么用的.可以用RNase消化RNA,纯化方面,柱纯化一个柱子的最大量为10ug,很麻烦;磁珠纯化要纯化800ugDNA也需要很多磁珠,不过比较好操作.

琼脂糖凝胶回收DNA 根据你扩增的产物情况选择合适分辨率的凝胶浓度,比如:如果你的条带离引物二聚体很远,且比较单一,那可用1%~1.5%的胶即可,可稍微制厚一点,方便点样;如果你的条带只有一两百即离引物二聚体很紧或者非目标条带很多,那你需要浓度稍大一点的胶(3%~5%),电泳时间长一点,这样可使你的目的条带与非目的条带分开,方便切胶。胶制好后即可点样,一般会使用宽一点的梳子可使上样量加大,提高回收浓度。点完样后即可开始电泳,电泳结束后,在紫外光仪下条带可显示出来,用薄的锋利的刀片快速将目标条带切下,切胶时要注意:尽量把目标条带切下,尽量包含较少的琼脂糖胶,并切忌将非目的条带切下,还要注意尽量让紫外线照射时间短(因为紫外照射会发生核苷酸变异,产生TT二聚体)。目标条带切下后,可使用专门的琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(很多公司都有),按照试剂盒的说明书即可回收其中的DNA。希望能帮到你,祝顺利!

#dna#薄层层析#琼脂糖#凝胶层析

随机阅读

qrcode
访问手机版