ZKX's LAB

金斯瑞设计引物 如何稀释新引物啊

2020-10-05知识15

那个公司可以帮助设计引物? 所有提供引物合成的公司都可以,如上海生工(国内订单份额最大),南京金斯瑞(国内最大的引物合成公司)。

金斯瑞设计引物 如何稀释新引物啊

如何看一个引物设计的好坏 通过引2113物的参数检测引物设计参数:a引物长度5261一般在20bp左右,上下游引物碱4102基长度不要相差超1653过4个碱基。b引物退火温度一般在58度,不同软件TM使用不同的算法,primer3,primer5,primer6,primerexpress等一般可以设置在55-58度,beacondesign可以设置在65左右。cGC含量一般没什么特殊要求,40-60最好,如果不好设计,30-80也是可以的。d产物长度在100-150,80-200也可以,不要在50bp左右,那样和引物二聚体不好区分,超过200bp可能会影响PCR扩增。e软件给出的引物不能有发卡结构和超过3-4个碱基的匹配,特别是3`端不能有碱基匹配,那样更容易形成二聚体。f引物设计好以后,在NCBI上做一个primer-blast,检测一下是否有非特异性扩增。最好还是通过实验验证,如果是定量PCR引物a溶解曲线单峰,窄而尖,否则可能有非特异性扩增;峰的位置横坐标一般在80度以上,这个温度为PCR产物的解链温度,如果在75度附近,可能是引物二聚体,miRNA染料法检测时,溶解曲线的峰的位置可能在75度附件b琼脂糖电泳为明亮的一条带,条带一般在100bp以上,如果设计引物时PCR产物在100bp一下,需要仔细辨认是否为引物二聚体;引物二聚体的条带一般在50bp左右。

金斯瑞设计引物 如何稀释新引物啊

三博远志引物合成做的好不好? 三博的速度是很快,第二天就能送过来,质量也很好,价格也挺实惠的。你可以一下他们的收费价格:1.常规DNA引物合成及价格2.随机引物合成价格3.修饰及特殊标记合成价格

金斯瑞设计引物 如何稀释新引物啊

金斯瑞和上海生工引物合成那个比较好 我们实验室一直用的是上海生工引物,也在生工测序,还是不错的。希望被采纳!

#引物设计#引物二聚体

随机阅读

qrcode
访问手机版