限制性核酸内切酶与外切酶的区别 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：李国健157359核酸外切酶exonuclease核酸外切酶是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解3、5-磷酸二酯键，降解核苷酸的酶。其水解的最终产物是单个的核苷酸（DNA为dNTP，RNA为NTP）。按作用的特性差异可以将其分为单链的核酸外切酶和双链的核酸外切酶。核酸内切酶endonuclease核酸内切酶是在核酸水解酶中，水解DNA分子链内部磷酸二酯键生成寡/寡聚核苷酸的酶。限制性核酸酶在原核和真核细胞中都有发现，按其性质可分为三大类。所谓Ⅰ型的酶要求DNA分子上有特定的识别顺序，但是切点却不在此识别顺序之中，而与之有一定距离。在反应中，它还要求有ATP和S-腺苷甲硫氨酸（SAM）。酶由不同的α，β，γ亚基组成32313133353236313431303231363533e59b9ee7ad9431333433623764。全酶兼有限制性内切酶的活性和甲基化酶的活性。Ⅲ型的酶与Ⅰ型的酶有相似特征，只是切点距识别顺序距离是严格的。Ⅱ型的酶，可说是独立的限制性核酸内切酶。因为，它并不兼有甲基化酶的活性。它切断DNA时不需ATP，也不需SAM。它的切点是严格的，而且就在识别顺序之中。所认知的位置多为短的回文序列，下面对Ⅱ型酶作进一步的介绍。常用的限制性核酸酶有。
基因组DNA用一种限制性内切酶酶切，一般能得到多少条条带 如果你用单酶切切割基因组DNA，你将得到一条弥散的带，什么条带都看不到。除非你做southern杂交后才能看见条带。看来你没做过这个实验啊。
DNA 酶切如何选择限制性内切酶，酶切后测序可以进行鉴定吗？ 有专门的软件可以寻找DNA序列段上的酶切位点。有酶切鉴定，有测序鉴定，酶切一般是初步鉴定，如果是某DNA段最好以测序结果为准。
分析影响限制性内切酶酶切的因素有哪些？ 参考答案：（1）温度：大部分限制性内切酶最适反应温度为37℃，少数酶高于或低于这个温度。（2）时间：合适，大多为1h，可过夜反应。（3）溶液体系：要求有稳定的pH环境。。
限制性外切酶是什么呢？与限制性内切酶有什么区别？ 核酸内切酶 endonuclease核酸内切酶是在核酸水解酶中，水解DNA分子链内部磷酸二酯键生成寡/寡聚核苷酸的酶.从对底物的特异性来看，可分为DNaseⅠ、DNaseⅡ等仅分解DNA的酶；脾脏RNase、RNaseT1等仅分解RNA的酶；还有就是如链孢霉（Neurospora）核酸酶这类既分解DNA又分解RNA的酶.一般来说，大都不具碱基特异性，但也有诸如HindⅢ、EcoRⅠ等具有限制性的，能够识别并切断特定的碱基或碱基序列的酶.核酸外切酶exonuclease核酸外切酶是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解3、5-磷酸二酯键，降解核苷酸的酶.其水解的最终产物是单个的核苷酸（DNA为dNTP，RNA为NTP）.按作用的特性差异可以将其分为单链的核酸外切酶和双链的核酸外切酶.核酸外切酶的作用：从核酸链的一端逐个水解下核苷酸.限制性核酸内切酶的作用：识别特定的核苷酸序列，并在DNA分子内部的一定位点切割DNA.
核酸内切酶与外切酶具体有那些区别
限制性内切酶 和 限制性外切酶的 “内切”，“外切”指什么？
限制性内切酶放置久了会影响酶切吗 限制性内切酶在符合保存条件的情况下放置久了不会影响酶切。酶的催化活性会受其他分子影响：抑制剂是可以降低酶活性的分子；激活剂则是可以增加酶活性的分子。有许多药物和毒药就是酶的抑制剂。酶的活性还可以被温度、化学环境（如pH值）、底物浓度以及电磁波（如微波）等许多因素所影响。内切酶，即限制性核酸内切酶。亦称限制性核酸酶。它是一种能催化多核苷酸的链断裂的酶，只对脱氧核糖核酸内一定碱基序列中某特一定位置发生作用，把这位置的链切开。通过内切酶可以把某一个遗传基因切下来，若再连在别的细胞的遗传基因上，便可使这细胞具有新的遗传特性。内切酶的发现和采用，使基因工程成为可能。有机体的生命活动表现了它内部化学反应历程的有序性，这种有序性是受多方面因素调节的，一旦破坏了这种有序性，就会导致代谢紊乱，产生疾病，甚至死亡。酶活力受到调节和控制是区别于一般催化剂的重要特征。
dna限制性内切酶酶切时，有哪些注意事项 1)购买的限制性内切酶 带有两种不同的酶切缓冲液，该用哪一种每种限制性内切酶 带有一管酶的最适反应液(通常是一种4-CORE反应液)，可能还带有一只MULTI-CORE反应液。
DNA限制性内切酶酶切的影响因素 当微量的污染物进入限制性内切酶贮存液中时，会影响其进一步使用，因此在吸取限制性内切酶时，每次都要用新的吸管头。如果采用两种限制性内切酶，必须要注意分别提供各自的最适盐浓度。若两者可用同一缓冲液，则可同时水解。若需要不同的盐浓度，则低盐浓度的限制性内切酶必须首先使用，随后调节盐浓度，再用高盐浓度的限制性内切酶水解。也可在第一个酶切反应完成后，用等体积酚/氯仿抽提，加0.1倍体积3mol/L NaAc和2倍体积无水乙醇，混匀后置-70℃低温冰箱30分钟，离心、干燥并重新溶于缓冲液后进行第二个酶切反应。
