如何分离产生碱性蛋白酶的芽孢杆菌 一.先配制以蛋白质为唯一氮源和碳源的固体琼脂培养基.二.（首先要明白两点：1、—NH2能够水解，与H2O反应生成—NH3＋和OH－，从而显示出碱性；2、—COOH能够电离，在水中生成—COO－和H＋，从而显示出酸性；3、氨基酸分之上，必须至少带有一个—COOH和一个—NH2明白以上几点就能够判断了要使其能够带正电，水解和电离后，总的来说氨基酸上的—NH3＋要多于—COO－，而生成一个—NH3＋就要得到一个OH－，生成一个—COO－就要得到一个H＋，因此得到的OH－要比H+多，因而显示出碱性；相反，要是带负电的话，那么就显示出酸性.）三.由上可知加入酚酞（或石蕊）等酸碱指示剂.四.加入土壤浸出液，出现红色圈的为蛋白质水解酶产生菌.五.用平板划线法或稀释涂布平板法分离纯化，即可得较纯种目的菌株.
蛋白分离纯化所使用的填料有哪些？
胞外蛋白酶的分离纯化、理化特性及其基因克隆
我要分离纯化一种未知酶，一切未知，想用凝胶层析和离子交换层析分离，不知选用什么填料合适？有好的建议
为什么分离与纯化胃蛋白酶要用碱性溶液？ 蛋白质学有个概念叫做“等电点”，等电点是一个pH值，在此pH值时蛋白质溶液的静电荷为0。注意等电点与“最适宜作用的pH值”数值相近，但并不是一个概念。蛋白质有一个性质就是在pH值远离等电点的溶液中，溶解度较高，接近等电点的溶液中溶解度低（当然要在一定范围内）。所以在分离纯化蛋白时，抽提液的pH值要远离目的蛋白的等电点，这样才能溶解更多的目的蛋白，提高抽提效率。又为了避免强酸强碱环境，所以酸性蛋白要用碱性溶剂，碱性蛋白要用酸性溶剂。对于胃蛋白酶，其适宜作用环境是较强酸性，所以它的等电点是pH的（约等于2），是酸性蛋白，要用碱性溶液。有朋友回答“防止自降解”是不对的。因为胃液就是强酸环境，如果能发生自降解，在胃里面早就发生了。在消化食物之前，消化酶就把自己消化了，这是不可能的。胃蛋白酶不具有自己能够识别和降解的区域，也就是说不会自己降解自己。最后说一句，在一定的条件范围内，即使酶失活，也是可以通过改变条件而恢复活性的=)诺贝尔团队·鱼
蛋白质的酸碱性苏教版课本说：“蛋白质分离纯化过程中酸性蛋白可以用稀碱性溶液抽提”我想查一下什么叫酸性蛋白，有人说等电点偏酸性的为酸性蛋白，举例为胃蛋白酶，但我查了一下胃蛋白酶等电点8.1，偏碱性呀，到底咋回事？
从土壤中分离纯化碱性蛋白酶牙孢杆菌的步骤是什么 该菌的最适产酶时间为48-60h，最适产酶pH位为11．0，最适产酶温度为30-35℃．该菌对氨苄青霉素和硫酸链霉素敏感，而对壮观霉素有抗性 分离可用调节pH值，温度以及用。
酶分离纯化过程中需要注意什么问题？为什么进行酶活力、酶比活力的测定 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：a995853256ppt制作：朱杰明ppt讲解：尹聪翔资料查找：陈荣威目酶的分离与纯化酶在分离纯化中应注意的问题酶活力录酶比活力酶活回收率酶比活力提高比酶的提取、分离纯化技术路线细胞破碎动物、植物或微生物细胞酶提取酶分离纯化酶浓缩酶贮存离心分离，过滤分离，沉淀分离，层析分离，电泳分离，萃取分离，结晶分离等。根据酶提取时，所采用的溶剂或溶液的不同，酶抽提的方法主要有盐溶液提取，酸溶液提取，碱溶液提取，有机溶剂提取等。1.盐溶液提取：大多数酶在一定浓度的盐存在条件下，酶的溶解度增加，即盐溶，但盐浓度不能太高，否则溶解度反而降低，即盐析。故：一般采用稀盐溶液进行酶的提取，盐浓度控制在0.020.5mol/L。如淀粉酶、蛋白酶等胞外酶0.14mol/l氯化钠溶液提取。2.酸溶液提取：有些酶在酸性条件下溶解度比较大，且稳定性好，宜用酸溶液提取。提取时需注意溶液的pH不能太低，以免酶变性失活。如胰蛋白酶可用0.12mol/l硫酸溶液提取。3.碱性溶液提取：有些酶在碱性条件下溶解度较大，且稳定性较好，宜用碱溶液提取，操作时注意pH不能过高，以免影响酶活，同时加碱液时要一边搅拌一边缓慢加进，避免局部过碱而。
