3．下表为5种限制性核酸内切酶（ 以下简称“限制酶”）的识别序列和切割位点（箭头位置）， 应该选DC的答案2113比较难理解，大家都知道不同5261的酶产生的粘性末端可以相同，所以D的答4102案很1653容易理解，如BgI II、BamH I两种限制酶。但也有些酶比较特殊，同种酶切出来的粘性末端是不一样的，如BbvC根据限制酶切割的特点，可将它们分为两大类：一类是切割部位无特异性的；另一类是可特异性地识别核苷酸序列。这种能被特异性识别的切割部位都具有回文序列，也就是在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。有一些限制酶的识别序列不是对称的，如 AccBSⅠ 和BssSⅠAccBSⅠ CCG↓CTC BssSⅠ C↓TCGTGGGC↑GAG GAGCA↑C有一些限制酶可识别多种序列，如 AccⅠ 识别的序列是 GT↓MKAC，也就是说可识别 4种序列，其中两种是对称的，另两种是非对称的。有一些限制酶识别的序列呈间断对称，对称序列之间含有若干个任意碱基。如AlwNⅠ 和DdeⅠ，它们的识别序列如下。AlwNⅠ CAGNNNC↓TG DdeⅠ C↓TNAGGT↑CNNNGAC GANT↑C限制酶在特定切割部位进行切割时，按照切割的方式，又可以分为错位切和平切两种。（1）识别位点为回文对称结构的序列经限制酶切割后，产生的末端为匹配粘端，亦即粘性末端，这样形成的两个末端是相同的，也是。
限制性核酸内切酶识别位点的序列为什么具有回文序列 因为限制酶切的是磷酸二酯键，两条链都要切，而限制酶只能识别一个位点即两条链必须有一段是相同的碱基序列，所以是回文序列
人工构建的大肠杆菌质粒pBR322是基因工程中应用最广泛的载体（见图1）．除标注外，图中其他英文缩写表示 （1）质粒是双链环状DNA分子；该质粒含有多种限制性核酸内切酶的酶切位点，可以作为多种目的基因的载体．ampr和tetr在基因工程中作为标记基因，用于筛选重组质粒．（2）①通过基因工程培育能合成人胰岛素的工程菌时，可先依据氨基酸的排列顺序推出信使RNA的碱基序列，再推出DNA（基因）的碱基序列，然后用化学方法人工合成A链和B链基因的片段．将此基因片段分别与2个不同质粒重组后，再导入大肠杆菌内．②大肠杆菌是原核生物，细胞中不会内质网、高尔基体等细胞器，不能对多肽链进行加工，因此在大肠杆菌内合成的单独的A、B两条多肽链没有生物活性．要直接获得有活性的转基因人胰岛素，可以选择真核细胞（如酵母菌）作为受体细胞．故答案为：（1）DNA 含有多种限制性核酸内切酶的酶切位点 作为标记基因（2）①氨基酸的排列顺序 信使RNA的碱基 DNA（基因）的碱基 不同质粒（2个质粒）②内质网、高尔基体等细胞器 对多肽链进行加工 真核细胞（酵母菌）
病毒核酸检测和病毒基因分型，用的是一个技术吗？ 病毒的核酸检测是检测病毒的量，病毒的基因分型是检测病毒的类型。我们就用丙肝病毒的检测来举例：要想知道体内有没有丙肝病毒感染，有多少丙肝病毒复制，则需要进行丙肝病毒核酸—HCV RNA的检测。只要能够检测出HCV RNA，就证明是现症丙肝病毒感染者，需要治疗。在治疗过程中，监测HCV RNA的量从高到低，最后消失，并彻底从体内清除。检测丙肝病毒核酸的方法用的是“多聚酶链反应”(polymerase chain reaction，英文缩写：PCR)的技术实时定量PCR等技术，将丙肝病毒核酸的信号扩增并用计算机算出的血液中病毒核酸含量。但丙肝病毒分为至少6种基因型，每种基因型的治疗方案(药物选择)有可能不太一样。因此，需要查查体内的丙肝病毒属于哪种血清型，也就是检测一下体内的病毒“长得什么样”。这就要检测病毒的基因序列（核苷酸的排列）了，所以，用的方法一般是核酸序列分析、基因测序等方法。对于大多数病毒感染来说，只需要检测体内有没有病毒，有多少病毒，所以一般只需要进行病毒核酸的检测。只有像丙肝病毒这样需要根据病毒基因型来选择治疗药物或科研时，才需要进行病毒基因分型的检测。所以，病毒核酸检测在临床上应用更为广泛。
限制酶是从细菌中提取出来的，那为什么不会内切细菌本身的DNA呢 限制酶 restriction enzyme 参与寄主支配性限制的酶。是可识别 DNA的特定碱基排列而切断链的核酸内切酶，因此，又称为核酸内切限制酶，目前已从各种细菌类中得到纯化的特异。
