ZKX's LAB

激光共聚焦显微镜的工作原理是什么?如何准备流式细胞的实验样品 共聚焦显微镜的z剖面分析

2020-10-04知识9

共聚焦显微镜的基本原理 传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描,标本上的被照射点,在探测针孔处成像,由探测针孔后的光电倍增管(PMT)或冷电耦器件(cCCD)逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点不会在探测针孔处成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面,克服了普通显微镜图像模糊的缺点。

激光共聚焦显微镜的工作原理是什么?如何准备流式细胞的实验样品 共聚焦显微镜的z剖面分析

倒置荧光显微镜与激光共聚焦显微镜有什么区别 荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别激光共聚焦显微镜是采用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。主要系统包括激光光源、自动显微镜、扫描模块(包括共聚焦光路通道和针孔、扫描镜、检测器)、数字信号处理器、计算机以及图象输出设备(显示器、彩色打印机)等。通过激光扫描共聚焦显微镜,可以对观察样品进行断层扫描和成像。因此,可以无损伤的观察和分析细胞的三维空间结构。同时,通过激光扫描共聚焦显微镜也是活细胞的动态观察、多重免疫荧光标记和离子荧光标记观察的有力工具.精确地对光谱的本质进行分析,区分发射光谱高度重叠的不同标记的信号。最重要的是,对于多色的荧光染色,它能彻底消除了荧光串色的影响,同时最大限度的减少了样品荧光信号的损失。这些都是一般光镜所不能达到的。

激光共聚焦显微镜的工作原理是什么?如何准备流式细胞的实验样品 共聚焦显微镜的z剖面分析

求助:激光共聚焦显微镜如何重建3D结构 激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscopeCLSM)近代先进细胞物医析仪器目前激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、态变化程等研究并提供定量荧光测定、定量图像析等实用研究手段结合其相关物技术形态、理、免疫、遗传等细胞物领域广泛应用 1.组织细胞定量荧光测定 激光扫描共聚焦显微镜固定荧光染色标本单波、双波或波模式单标记或标记细胞及组织标本共聚焦荧光进行数据采集定量析,同利用沿纵轴移标本进行光切片叠加 形组织或细胞荧光标记结构总体图像,显示荧光形态结构精确定位 用于原位杂交、肿瘤细胞凋亡观察、单细胞水平 DNA 损伤及修复等定量析 2.细胞间通讯研究 物植物细胞缝隙连接介导胞间通信细胞增殖化起着重要作用 激光扫描共聚焦显微镜通观察细胞缝隙连接转移测量传递细胞调控信息些离、物质 该技术用于研究胚胎发、殖发育、神经物、肿瘤发等程缝隙连接通讯基本机制作用用于鉴别缝隙连接作用潜毒性化物质 3.细胞物理化测定 激光扫描共聚焦显微镜细胞形状、周、面积、平均荧光强度及细胞内颗粒数等参数进行自测定 能细胞溶酶体、线粒体、内质中国、细胞骨架、结构性蛋白质、DNA、RNA、酶受体等细胞内特异结构含量、组。

激光共聚焦显微镜的工作原理是什么?如何准备流式细胞的实验样品 共聚焦显微镜的z剖面分析

Annexin V-FITC/PI双染色用激光共聚焦显微镜检测的实验方法 Annexin V-FITC/PI双染色用荧光显微镜观察方法 1.悬浮细胞染色后,滴一滴细胞悬液于载玻片上,用盖玻片盖上细胞,荧光显微镜下观察。2.贴壁细胞可以象悬浮细胞那样染色后。

荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别 一个高档一个低档而已,看个人需要传统荧光显微镜使用荧光物质标志细胞中的特定结构,不仅图像与背景的对比度增强,而且由于许多荧光显微镜的光源使用短波长的紫外光当所。

共聚焦和传统显微镜有什么区别?共聚焦有什么劣势呢? 3 苏州微清医疗官网www.microcleartech.com ? 9 ? ? 2 条评论 已认证的官方帐号 8 人赞同了该回答 生命科学成像的目标(器官、组织、细胞甚至亚细胞结构和蛋白等。

激光共聚焦显微镜的工作原理是什么?如何准备流式细胞的实验样品 采用点光源照射标本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的荧光被物镜收集,并沿原照射光路回送到由双向色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔,分别称为照明针孔和探测针孔。两者的几何尺寸一致,约100-200nm;相对于焦平面上的光点,两者是共轭的,即光点通过一系列的透镜,最终可同时聚焦于照明针孔和探测针孔。这样,来自焦平面的光,可以会聚在探测孔范围之内,而来自焦平面上方或下方的散射光都被挡在探测孔之外而不能成像。以激光逐点扫描样品,探测针孔后的光电倍增管也逐点获得对应光点的共聚焦图像,转为数字信号传输至计算机,最终在屏幕上聚合成清晰的整个焦平面的共聚焦图像。

荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别 共1 荧光显微镜(Fluorescence microscope):荧光显微镜是以紫外线为光源,用以照射被检物体,使之发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。。

#共聚焦显微镜#荧光强度#荧光蛋白#荧光分析法#荧光检测

随机阅读

qrcode
访问手机版