DNA或RNA样品不纯,用紫外分光光度计测定其浓度和纯度的准确性会受到影响,为什么? 分光光度计分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸在波长 260 nm处有最高吸收峰。吸收紫外光的性质是嘌呤环和嘧啶环的共轭双键系统所具有的,所以嘌呤和嘧啶以及一切含有它们的物质,不论是核苷、核苷酸或核酸都有吸收紫外光的特性。但紫外法不能区分DNA和RNA,只能用来鉴定核酸的纯度和含量。蛋白质由于含有芳香氨基酸,因此也能吸收紫外光。通常蛋白质的吸收高峰在280nm波长处,在260nm处的吸收值公为核酸的十分之一或更低,故核酸样品中蛋白质含量较低时对核酸的紫外测定影响不大。RNA的260nm与280nm吸收的比值在2.0以上;DNA的260nm与280nm吸收的比值则在1.9左右。当样品中蛋白质含量较高时比值即下降。分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。核酸的定量DNA和RNA都有吸收紫外光的性质,它们的吸收高峰在260nm波长处,每种核酸。紫外分光光度计是用来干什么的?它的工作原理是什么? 紫外分光光度计对于大多数人来说还是相当陌生的,我们在先了解其工作原理的基础上再来知晓其主要用途。紫外分光光度计基本工作原理:紫外分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似,利用一定频率的紫外-可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内,对于一个特定的波长,吸收的程度正比于试样中该成分的浓度,因此测量光谱可以进行定性分析,而且根据吸收与已知浓度的标样的比较,还能进行定量分析www.botianshengda.net/btsd-Article-40936紫外分光光度计特点和主要用途:紫外-可见光谱仪涉及的波长范围是0.2-0.8微米(对应波数50000-12500厘米-1),它在有机化学研究中得到广泛的应用。通常用作物质鉴定、纯度检查,有机分子结构的研究。在定量方面,可测定结构比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量,也可以测定物质的离解常数,络合物的稳定常数,物质分子量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作检测器等。紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。2、所用的灯不同:(1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常采用钨灯或卤钨灯。3、原理不同:(1)紫外分光光度计根据物质的吸收光谱研究物质的成分,是结构和物质间相互作用的有效手段。(2)可见分光光度计采用低杂散光,高分辨率的单光束单色器,保证了波长准确度、波长重复性和更高的分辨率。扩展资料紫外分光光度计的工作原理:物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同。因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。又因为许多物质在紫外-可见光区有特征吸收峰,所以可用紫外分光。紫外分光光度计怎么鉴别手性化合物 据我所知,可能不能鉴别。紫外可见光谱检测的是基团的电子跃迁情况,手性化合物有相同的基团,只是空间结构不同,通过紫外应该不能鉴别。可以用核磁或x射线衍射。紫外分光光度计如何鉴别是好是坏 三点1波长准确度小于0.25nm2波长重复性小于0.1nm3基线直线性小于0.005Abs符合以上三点就为合格这是国家标准紫外分光光度计鉴别物质 us紫外可见分光光度计的测定范围是多少 UV-2600A紫外可见分光光度计 技术参数 1.光谱带宽:1.8nm(4nm可选)(UV-2600),2nm(UV-2600A)2.光度精度:±0.002Abs(0-0.5Abs)±0.003(0.5-1Abs)0.2%T 3.光度重复性:±0.0008Abs(0-0.5Abs);0.0015(0.5-1.0Abs)±0.15%T 4.波长范围:320-1100nm(2600),190-1100nm(UV-2600)5.波长精度:±0.5nm 6.波长重复性:0.15nm 7.波长显示:0.05nm 8.杂散光:≤0.03%T@220nm和340nm 9.光度范围:0~200%T,-0.4~4.0Abs 10.光学系统:双光束比例检测(单光束可选),1200条/毫米衍射全息光栅
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