原生质体的液体培养有哪些方法？
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原生质体的固体培养法有哪些步骤？
《植物细胞工程实验》 原生质体的制备与培养要注意哪些问题，常用的原生质体培养有哪些方法？ 酶解法，适宜的温度，常用的方法化学方法和物理方法，聚乙二醇，离心振动电刺激
做植物原生质体培养的培养基都有哪些？ MS培养基：1962年穆拉辛格2113和斯库格为5261烟草细胞培养而设计，其中硝酸盐的4102浓度高，适合1653植物原生质体、细胞和组织培养。B5培养基：1968年甘伯尔格为大豆细胞培养而设计，铵的浓度低。适合木本植物的组织和细胞培养。富盐平衡培养基：是目前使用最广泛的一类，代表性的培养基有MS、LS、BL、BM、ER等。特点是：无机盐浓度高，微量元素种类齐全，浓度高；元素间比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲能力、稳定性好、营养丰富，一般培养时无需再加入有机成分。高硝态氮培养基：代表性培养基有B5、N6、SH。特点是：硝酸钾浓度高，氨态氮浓度低，含有较高浓度的硫胺素（VB1）。中盐培养基：代表性培养基有Nitsch、Miller、Blaydes、H。大多是在MS培养基基础上进行改良设计。特点是：大量元素无机盐为MS的一半，微量元素种类减少、含量增高。维生素种类比MS增多，例如增加了生物素、叶酸等。低盐培养基：代表性培养基有White、WS、HE、HB。特点是：无机盐、有机成分含量浓度低，多用作生根培养的培养基。
原生质体培养的方法有哪些发现？ 由于很多实验已证实了琼脂糖比琼脂更适于原生质体培养，近年来又发展了琼脂糖固体培养和液体培养相结合的方法。用几种植物的原生质体做实zhidao验，发现尽管琼脂糖提高了植板率，但到细胞团阶段后就难以再继续发育。这可能是由于培养物把固体培养基中的营养耗尽所造成的。已发展一种“念珠培养”法，即把含有原生质体的琼脂糖培养基切成块放到大体积的液体培养基中，并在旋转摇床上振荡以利于通气。使用大体积的液体是为了防止琼脂糖块过渡破碎。用这种方法，不仅进一步提高一些种（如番茄原生质体）的植板率，而且使一些以前从未超过细胞团阶段的种，如芜菁和矮牵牛原生质体能够持续地分裂。在水稻原生质体培养中专使用的琼脂糖泡培养法也是固、液结合的一个好属方法。把含有原生质体的琼脂糖念珠培养基以大约50μL一滴，滴在直径5.5cm的培养皿中，固化后，再向其中添加3mL液体培养基，这样，琼脂糖滴就处于液体培养基的包围之中。在培养过程中，可以通过改变液体培养基的渗透浓度来逐渐降低固体培养基的渗透浓度，以便使培养物持续地生长发育。
植物原生质体培养的特点有哪些
什么是原生质体的微室培养法？ 有微室培养法和纸桥培养法。微室培养法（culture：in：a：microchamber）是指人工制造一个微室，将原生质体培养在微室中的少量培养基中，使其分裂增殖形成细胞团的方法。这一方法是由Jones等人（1960）设计的，其中用条件培养基（conditioned：medium）代替了看护组织，将原生质体置于微室中进行培养。这个方法的主要优点是：在培养过程中可以连续进行显微观察，将一个细胞的生长、分裂和形成细胞团的全过程记录下来。微室培养法的具体做法是先由悬浮培养物中取出一滴只含有一个原生质体的培养液，置于一张无菌载玻片上，在这滴培养液的四周与之隔一定距离加上一圈石蜡油，构成微室的“围墙”，在“围墙”左右两侧再各加一滴石蜡油，每滴之上置一张盖玻片作为微室的“支柱”，然后将第三张盖架在两个“支柱”之间，构成微室的“屋顶”，于是那滴含有单细胞的培养液就被覆盖于微室中。构成“围墙”的石蜡油能阻止微室中水分的丢失，但不妨碍气体的交换。最后把上面筑有微室的整张载玻片置于培养皿中进行培养。当细胞团长到一定大小后，揭掉盖玻片，把细胞团转移到新鲜的液体或半固体培养基上进行培养。在难以获得足够数量的细胞时，可采用微室培养法进行培养，以保证。
