定量pcr看家基因 请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右，而目的基因ct值在25左右 有哪位高手能指点一下

看家基因作用是什么？实时荧光定量PCR技术中为什么要用它？ 看家基因的意思是稳定表达的一种基因 所以他的作用就是用来做内参 比如在做PCR的时候，初始的模板量的不同直接导致扩增后的量的差别，那么看家基因的作用就出现了，要在看家。看家基因作用是什么？实时荧光定量PCR技术中为什么要用它？ 看家基因的意思是稳定表达的一种基因所以他的作用就是用来做内参比如在做PCR的时候，初始的模板量的不同直接导致扩增后的量的差别，那么看家基因的作用就出现了，要在看家基因的表达水平相同的情况下，比较其他基因的表达是否有升高或降低。实时定量数据处理时对照组的基因相对表达量怎么计算？ 如何通过荧光定量目的基因和GAPDH计算相对表达量内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因，又叫看家基因，比如常用的GAPDH，actin。或者18s rRNA也可以。如果内参表达量一致，说明你PCR的上样量一致，样本的质量也一致。如果出入很大，说明你的样本的浓度或者是质量有问题。测到的目的基因的表达量就不可靠了管家基因是用来定量的。用来计算相对表达量。管家基因在相同量样品中的表达量我们认为是一致的。然后根据这个量来计算你的基因在不同样品中的表达量。所以每一个都需要单独的样品。基因组干扰需要你在提取RNA以后用DNase处理样品。如果不放心，可以拿处理过的RNA做膜版，跑一次，如果有带就是有污染，如果没有可以合成cDNA库了。实施定量PCR扩管家基因失败，为什么？ 博凌科为-为你解答：荧光摄取的温度是否正确？应该在溶解曲线峰的前面的温度收集请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右，而目的基因ct值在25左右 有哪位高手能指点一下 你选了个什么内参，表达量如此之低？感觉有点问题，检查一下融解曲线对不对。如果是正确的，说明你的目的基因表达量比内参高出一千倍啊。Ct值越大，表达量越低。急问：用实施定量PCR测基因表达水平，是先提提总RNA吗？然后再分离出mRNA？对不对？另外，Ct值是直接得出 Ct值是通过PCR仪的分析软件直接得出 的，一般要做一个看家基因座内参荧光定量PCR的内参和目的基因一定要放一起吗 荧光定量PCR的内参和目的基因一定要放一起内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因，又叫看家基因，比如常用的GAPDH，actin。或者18s rRNA也可以。如果内参表达量。做相对定量PCR 时，目的基因CT 值比内参基因CT 值低，是什么原因，别人 有多种原因。如果根据经验目的基因的表达确实应该低于内参基因的话，常见的问题是模板异常，如严重的DNA污染等。但也不排除其他原因，如引物特异性等。

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