连接酶主要在哪生有 连接酶就是将两段核酸连接起来的酶,相当于基因工程中的“糨糊”。现已发现几种不同来源或作用于不同底物的连接酶。1.T4 DNA 连接酶 T4 DNA连接酶的分子量为68kDa,催化。T4噬菌体DNA连接酶是什么 DNA连接酶是一种在DNA复制、修复和重组过程中发挥作用的、催化两脱氧核糖间以磷酸二酯键抄接合的酶。DNA连接酶主要用于基因工程,将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合,故也称“基因针线”。T4DNA连接酶,来源袭于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低。噬菌体T4DNA连接酶分子是一条多肽链,分子量为60Ku,其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程zhidao需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA,DNA-RNA,RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。E.coliDNA连接酶和T4连接酶的区别 E·coliDNA连接酶是从大肠杆菌中获得的DNA 连接酶 只能连接粘性末端 而平末端则要交给T4DNA连接酶了 它可以连接粘性末端也可以连接平末端NEB-T4 DNA Lagase注意事项 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:隐翼龙龙一、关于NEBM0202T4DNA连接酶的使用方法和常见问题及解答1、产品特性和使用方法产品说明:该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑末端或粘性末端DNA之间的连接,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口(1)。来源:源于E.coliC600pcl857pPLc28lig8(2)。应用:限制性酶切片段的克隆(3)。将linker或adapters连接到DNA片段的平滑末端。反应缓冲液:1XT4DNALigaseBuffer:[50mMTris-HCl,10mMMgCl2,10mMDTT,1mMATP,25μg/mlBSA,(pH7.5@25°C)]。推荐DNA浓度(0.1-1μM的5′末端)。使用注意:ATP是反应必须的辅因子。这一点与要求NAD作辅因子的大肠杆菌DNA连接酶不同。如在反应体系中补加1mM的ATP,连接反应还可以在NEB提供的四种限制性内切酶缓冲液(NEBuffers)或在T4DNA多聚核苷酸激酶缓冲液中进行。质量保证:无核酸内、外切酶污染。每批T4DNA连接酶均通过模拟克隆实验进行检测,该实验可以检测出待连接DNA末端的任何破坏。结果表明>;99.9%的DNA末端未受任何降解。单位定义(粘性末端活性单位):在20μl连接反应体系、0.12μM(300μg/ml)的5'-末端浓度条件。RNA是否有连接酶?有的话又叫什么名字?连接位点又是什么的? 有啊,T4 RNA连接酶,很多地方有卖的。以NEB为例,有T4 RNA连接酶1和2。1可以连接单链RNA,2连接双链RNA。原理与T4 DNA ligase一样,连接酶都是催化5'3'之间的磷酸二酯键的。
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