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DNA的变性和复性 最常用的两种多路复技术

2020-10-02知识16

复型技术的方法有哪些呢?

DNA的变性和复性 最常用的两种多路复技术

.多路复用技术主要有几种类型?它们各有什么特点 答:多路复用技术分为以下四种:1、频分多路复用,特点是把电路或空间的频带资源分为多个频段,并将其分配给多个用户,每个用户终端的数据通过分配给它的子通路传输.主要用于电话和电缆电视系统.2、时分多路复用,特点是按传输的时间进行分割,将不同信号在不同时间内传送.又包含两种方式:同步时分复用和异步时分复用.3、波分多路复用,特点是对于光的频分复用.做到用一根光纤来同时传输与多个频率很接近的光波信号.4、码分多路复用,特点是每个用户可在同一时间使用同样的频带进行通信,是一种共享信道的方法.通信各方面之间不会相互干扰,且抗干扰能力强.

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最常用的两种多路复用技术为_______和_______,其中,前者是。。。 频分复用时分复用

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什么是多路复用?有几种常用的多路复用技术?

一、2113PCR技术基本原理有:1、PCR技术的基本原理类似于DNA的天5261然复制过程,其特异性依4102赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物1653。2、PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板-引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性-退火-延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。二、PCR的最大特点,是能将微量的DNA大幅增加。因此,无论是化石中的古生物、历史人物的残骸,还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液,只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大,进行比对。这也是“微量。

DNA的变性和复性 DNA的变性、复性和杂交1.变性,这是DNA最重要的一个性质.①DNA双链之间以氢键连接,氢键是一种次级键,能量较低,易受破坏,在某些理化因素作用下,DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂,使DNA双螺旋结构松散,变成单链,即为DNA变性.DNA变性只涉及二级结构改变,不伴随一级共价键的断裂.②监测DNA是否变性的一个最常用的指标是DNA在紫外区260nm波长处的吸收光值变化.因为DNA变性时,DNA双链发生解离,共轭双键更充分暴露,故DNA变性,DNA在260nm处的吸收光度值增加,并与解链程度有一定的比例关系,这种关系叫做DNA的增色效应.③DNA的变性从开始到解链完全,是在一个相当窄的温度内完成的,在这一范围内,紫外光吸收值增加达到最大增加值的50%时的温度叫做DNA的解链温度(Tm).一种DNA分子的 Tm值的大小与其所含碱基中的 G+C的比例相关也与DNA分子大小及变性条件有关,G+C的比例越高,DNA分子越长,溶液离子强度越高,Tm值越大.④加热、低盐及强酸、强碱均可使DNA变性.2.复性变性DNA在适当条件下,两条互补链可重新恢复天然的双螺旋构象,这种现象称为复性.热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,这一过程也叫退火,一般认为,比Tm值低 25℃ 的温度是DNA复性的最佳条件.3.DNA复性的实际应用—杂交:通过。

PCR实验方法步骤 一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s→58℃ 30s→72℃ 60s,循环30-35次,最后在72℃ 保温7min。3 结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期。

请教:简述多路复用技术的作用.

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