请教：植物原生质体培养中，台盼蓝染色的方法以及台盼蓝染液的配制。台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。。
植物原生质体培养的特点有哪些 主要有液体浅层培养法、液体悬滴培养、固体平板法、固液双层培养法（应用最广泛）、琼脂糖珠培养法
木本植物原生质的体培养有哪些培养基？ 木本植物原生质体培养多采用液体浅层培养，基本培养基多用MS、改良MS和KM8P，所添加的外源激素依培养材料及培养时期而定，主要用细胞分裂素和生长素，一般原生质体培养形成微愈伤组织较愈伤组织增殖需较低的外源激素，如从枣胚性悬浮细胞获得的原生质体在KM8P+NAA：0.3+ZT：0.2经70d液体浅层培养可获得微愈伤组织，而增殖则在KM8P+NAA：3+ZT：0.2或12MS+NAA：3+ZT：2的琼脂培养基上进行。原生质体的植板密度也是影响其培养成功的关键因素之一。密度过大，原生质体再生细胞团小，影响生长；密度过小，原生质体内含物外渗。不同种类植物原生质体的最适培养密度不同，如苹果上要求至少5×10superscript4superscript个mL，枣则为5×10superscript5superscript个mL，山杏为0.5×10superscript5superscript个mL，即使同一基因型、不同材料的原生质体，其最适的植板密度也不尽相同，如猕猴桃有的为1×10superscript6superscript个mL，有的为1×10superscript5superscript个mL，有的为5×10superscript4superscript个mL，苹果茎原生质体较叶肉需较高的植板密度，具体操作时应因树种、品种等材料类型不同而进行先行试验。诱导原生质体融合普遍使用NaNOsubscript3subscript处理。
请分别简述，植物组织培养、植物细胞培养、植物原生质体培养的过程。 植物组织培养：1 植物进行切割形成外植体（芽 茎 根尖等）2 外植体离体培养脱分化形成愈伤组织（这里需要高浓度的生长素和细胞分裂素强烈促进形成愈伤组织，同时要暗培养，防止分化成其他组织）3 愈伤组织在分化形成植株（要一定光照，细胞分裂素/生长素 比值高时，形成芽，低时，形成根）条件：整个过程中要确保无菌，且必须有植物生长所需营养：无机盐，糖类等，尤其是激素）原理：细胞全能性植物细胞培养：目的与植物组织培养不同，前者要获得植株，而细胞培养要获得细胞次级代谢产物1 2与组织培养相同3 愈伤组织在液体培养基中形成悬浮细胞，过程中获得代谢产物（悬浮细胞的特点是细胞质丰富，液泡小而细胞核大）植物体细胞杂交：1去细胞壁，在0.5-0.6mol/l的甘露醇溶液，纤维素酶，果胶酶作用下，分解细胞壁，得到原生质体（一般都用纤维素酶）2 利用物理方法：离心，震荡等，化学方法：聚二乙醇（一般都这个）得到杂交细胞3 诱导细胞，形成植株，再生细胞壁（新植株生成标志）。注意，这里要进行筛选，得到AA BB AB细胞，我们需要的是AB细胞！条件：同上原理：细胞膜的流动性优点：克服远缘杂交不亲和的障碍（这句话出现频率很高的）纯手打！不懂。
做植物原生质体培养的培养基都有哪些？ MS培养基：1962年穆拉辛格2113和斯库格为5261烟草细胞培养而设计，其中硝酸盐的4102浓度高，适合1653植物原生质体、细胞和组织培养。B5培养基：1968年甘伯尔格为大豆细胞培养而设计，铵的浓度低。适合木本植物的组织和细胞培养。富盐平衡培养基：是目前使用最广泛的一类，代表性的培养基有MS、LS、BL、BM、ER等。特点是：无机盐浓度高，微量元素种类齐全，浓度高；元素间比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲能力、稳定性好、营养丰富，一般培养时无需再加入有机成分。高硝态氮培养基：代表性培养基有B5、N6、SH。特点是：硝酸钾浓度高，氨态氮浓度低，含有较高浓度的硫胺素（VB1）。中盐培养基：代表性培养基有Nitsch、Miller、Blaydes、H。大多是在MS培养基基础上进行改良设计。特点是：大量元素无机盐为MS的一半，微量元素种类减少、含量增高。维生素种类比MS增多，例如增加了生物素、叶酸等。低盐培养基：代表性培养基有White、WS、HE、HB。特点是：无机盐、有机成分含量浓度低，多用作生根培养的培养基。
原生质体的培养在园艺植物上有哪些应用？ 作为传统育种的辅助手段，体细胞杂交不仅可以克服有性杂交的不亲和性、不育性，还能够快速组合园艺植物的一些优良农艺性状，或者将野生种的个别有用性状引入园艺植物栽培种。另外，体细胞杂交明显优于有性杂交，是由于它可以对细胞质进行遗传操作，引起线粒体、叶绿体等细胞器基因组的重组，因此，体细胞杂交创造变异的潜力很大，能够丰富种质资源，保持和促进生物多样性。
