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用甲醛做蛋白质和DNA交联的时候,用甘氨酸终止交联的原理是什么? DNA和蛋白质交联是指

2020-09-30知识14

什么是dna蛋白质交联作用的好坏P酸+5碳糖+含氮碱基形成脱氧核酸【DNA】,通过转录+翻译【涉及到的有转移RNA,信使RNA】然后识别信使RNA上的碱基排列顺序,把密码子连接起来,同时转移RNA上核糖体脱落形成氨基酸,氨基酸的排列顺序

用甲醛做蛋白质和DNA交联的时候,用甘氨酸终止交联的原理是什么? DNA和蛋白质交联是指

蛋白与dna交联后怎样进行电泳 染色2113质免疫沉淀,所以对ChIP实验过程的每5261一步都应设计相应的对4102照.当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,在生理1653状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起.如果你是只知道你的蛋白.染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定,可是双链或者是单链,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,以及DNA的鉴定,通过超声或酶处理将染色质切为小片段后,用chip,DNA核苷酸探针用g-32P和T4多核苷酸激酶来作末端标记,染色质断裂,或核细胞抽提液,部分纯化蛋白.ChIP.同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,结果的重复性较低.具体的试剂和步骤你上网搜搜吧~自己实验室,分离复合物和非结合的探针,将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,交联反应的逆转,样品有差异.DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢,可以用emsa,只是想验证它俩的结合,利用抗原抗体的特异性识别反应,而且对结果的分析也需要有一定的经验,DNA的纯化,还是要再优化的 emsa怎么确定已知蛋白会与什么基因的启动子结合如果已知序列,可用纯化蛋白,想钓出你的基因.因为ChIP实验涉及的步骤多

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用甲醛做蛋白质和DNA交联的时候,用甘氨酸终止交联的原理是什么? 氨基和甲醛缩合链终止

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什么是DNA交联 DNA分子的两条链或同一DNA链的不同区段的侧链间形成的共价相互作用。通过交联能增加DNA分子的刚性。

什么叫DNA-交联? DNA(Deoxyribonucleic acid),中文译名为脱氧核糖核酸,是染色体的主要化学成分,同时也是基因组成的,有时被称为“遗传微粒”.DNA交联是细胞内发生的严重事件,它影响DNA的正常复制功能,从而导致突变或肿瘤.

已知一段基因序列,怎么知道有什么蛋白质结合到其DNA上? 除了用ChIP或streptavidin biotin-label DNA pull dowm,还有什么好方法么?

什么是染色质免疫共沉淀技术(ChIP)? 染色质免疫共沉淀技术是在保持组蛋白和DNA联合的同时,通过运用对应于一个特定组蛋白标记的生物抗体,染色质被切成很小的片断,并沉淀下来的技术。这项技术主要用来分析目标基因有没有活性、或者分析一种已知蛋白(转录因子)的靶基因有哪些。该技术主要应用于以下几方面:1.组蛋白修饰酶的抗体作为“生物标记”2.转录调控分析3.药物开发研究4.有丝分裂研究5.DNA损失与凋亡分析扩展资料:实验步骤:1、细胞固定甲醛能有效的使蛋白质-蛋白质,蛋白质-DNA,蛋白质-RNA交联,形成生物复合体,防止细胞内组分的重新分布。甲醛的交联反应是完全可逆的,便于在后续步骤中对DNA和蛋白质进行分析。交联所用的甲醛终浓度为1%,交联时间通常为5分钟到1个小时,具体时间根据实验而定。值得注意的是,交联时间如果过长,细胞染色质难以用超声波破碎,影响ChIP结果,而且实验材料也容易在离心过程中丢失。交联时间如果过短,则交联不完全,产生假阴性。甲醛的交联反应可被加入的甘氨酸终止。2、染色质断裂交联后的染色质可被超声波或Micrococcal Nuclease切成400~600 bp的片段(用琼脂糖凝胶电泳检测),以便暴露目标蛋白,利于抗体识别。超声波是使用机械力断裂染色质。

哪些因素引起蛋白质交联? 蛋白质的变性是蛋白质空间和形态、功能发生的变化,最简单的例子就是,把打碎的鸡蛋里面加入盐的成分,鸡蛋由浑浊状态变成透明状态,这就是蛋白质的变性 化学交联和酶交联。.

电离辐射引起DNA交联的形式有() A.DNA-蛋白质交联 B.DNA-核糖体交联 参考答案:A,C,D

#dna序列#dna复制#dna#dna变性#交联反应

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