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碱性蛋白酶活性测定实验报告 碱性蛋白酶活力测定实验中最后加入福林酚的原因是什么

2020-09-25知识13

碱性蛋白酶活力的测定中为什么要把反应条件控制在pH为11,温度为40?

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碱性蛋白酶测定酶活力时为什么要先要固定化 这个不一定要固定化吧,游离的也可以测啊!

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测定蛋白酶活力实验 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:临泽潇洒哥测定蛋白酶活力实2113验一、实验5261目的1.加深了解酶活力的概念。41022.学习掌握测定蛋白酶活1653力的方法。二、实验原理酶活力指酶催化某一特定反应的能力。其大小可用在一定条件下酶催化反应进行一定时间后,反应体系中底物的减少量或产物的生成量来表示。酶活力单位是表示酶活力大小的重要指标。本实验规定酶活力单位(U)为一定条件下每分钟分解1μg酪氨酸所需的酶量。实验选用枯草杆菌蛋白酶水解酪蛋白产生酪氨酸的反应体系。产物酪氨酸在碱性条件下与Folin-酚试剂反应生成蓝色化合物,该蓝色化合物在680nm处有最大光吸收,其吸光值与酪氨酸含量呈正比。因此通过测定一定条件下产物酪氨酸的含量变化,可计算出蛋白酶的活力。三、仪器和试剂仪器:恒温水浴锅、分光光度计、试管及试管架、干燥滤纸、玻璃漏斗。原料枯草杆菌蛋白酶:称取1g枯草杆菌蛋白酶粉,用少量0.02mol/L,pH7.5磷酸缓冲液溶解并定容至100mL,震荡15分钟,使充分溶解,干纱布过滤,取滤液冰箱备用。使用时视酶活力高低用缓冲液适当稀释。试剂1.Folin-酚试剂:在2L磨口回流瓶中加入钨酸钠(Na2WoO4.2H2O)100g,钼酸钠(Na2WoO4.2H2O)25g,蒸馏水。

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做胃蛋白酶活力实验时加三氯醋酸有什么作用 仅供参考:1.1原理 福林试剂在碱性条件下可被酚类化合物还原呈蓝色反应(钼蓝和钨蓝的混合物)。由于蛋白质分子中有含酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸等),它。

酶活力的常用测定方法? 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:马晓晓碱性蛋2113白酶及各种蛋白酶活力5261测定方法及测定有感因长期测定4102碱性蛋白酶酶活力与角蛋白酶1653活力与胶原酶活力和弹性蛋白酶活力,碱性蛋白酶活力测定还好,因有国家标准,测定按照国标来便可大大减少误差。其余酶活力测定过程中因无统一标准且底物差异大,导致长期酶活力测定的混乱,各种酶活力测定方法与各种试剂添加,最后实际测定的酶活力只能仅作参考。以下是各种蛋白酶活力测定方法及标曲绘制:碱性蛋白酶测定方法根据国标GB/T23527-2009附录B蛋白酶活力测定福林法以下是方法碱性蛋白酶的测定方法参考GB/T23527-2009附录B中福林酚法进行,即1个酶活力单位(U/mL)定义为1mL酶液在40℃、pH=10.5条件下反应1min水解酪蛋白产生1μg酪氨酸所需要的酶量,主要步骤如下。2.2.6.1标准曲线的绘制(1)L-酪氨酸标准溶液:按表2-6配制。管号表2-6L-酪氨酸标准溶液配置表Table2-6L-Tyrosinestandardsolutionform酪氨酸标准溶液的浓度/(μg/mL)取100μg/mL酪氨酸标准溶液的体积/(mL)取水的体积/(mL)001102203304405500101928374655(2)分别取上述溶液各1.00mL,各加0.4mol/L碳酸钠溶液5.0mL,福林试剂使用液1。.

碱性蛋白酶活力测定实验中最后加入福林酚的原因是什么 与蛋白酶水解生成的酪氨酸反应生成有色物质,在680nm处检测吸光度,其与酪氨酸含量成正比

#碱性蛋白酶#胃蛋白酶#醋酸#酪氨酸

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