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看家基因在pcr 内源基因在pcr检定转基因成分时起什么作用

2020-09-24知识18

内源基因在pcr检定转基因成分时起什么作用 建立一种利用TaqMan荧光PCR定量技术不依赖参比内源基因测定转基因植物外源基因拷贝数的分析方法。方法:以转基因大豆RRS和转基因玉米Bt176为材料,通过转基因植物外源基因与。

看家基因在pcr 内源基因在pcr检定转基因成分时起什么作用

看家基因作用是什么?实时荧光定量PCR技术中为什么要用它? 看家基因的意思是稳定表达的一种基因 所以他的作用就是用来做内参 比如在做PCR的时候,初始的模板量的不同直接导致扩增后的量的差别,那么看家基因的作用就出现了,要在。

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做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 你说的应该是real time PCR吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来.常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(real time)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值但是呢,由于之前RNA提取、反转等步骤,各个步骤存在不同的效率,ct值并无法真实反应样品中模版的绝对量,因此,需要一个内参来做为参考.比方说,A基因的ct值,在a样品中是18,在b样品中是20,由于a b样品存在RNA质量等等一系列不同,你无法直接就判断这个基因在a样品中的表达量是b样品的4倍.这时候,我们需要一个内参,假如内参ct值在a样品中是14,而在b样品中是15.由于内参的稳定性,在不同样品中被认为是表达量一致的,因此,A基因的在ab样品之间的-ΔΔct值是1,也就是表达量为2倍的关系.这里,我们可以知道内参的作用,即通过测量内参,可以在后面分析过程中将不同样品的起始量均一化.内参需要选择在不同样品中有稳定表达量的基因,这就是为什么内参经常选择看家基因的原因.以小鼠为例,常用的内参有actin gapdh hprt等等.当然,现在的很多观点认为这些基因在不同组织中丰度也不同,例如gapdh,在线粒体含量高的组织中丰度高,很多人认为用基因组DNA做内参会更加靠谱,当然这是后话了,选择gapdh无碍于。

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real time PCR看家基因的选择重要吗

看家基因作用是什么?实时荧光定量PCR技术中为什么要用它? 看家基因的意思是稳定表达2113的一种基因5261所以他的作用就是用来做4102内参比如在做PCR的时候,初始的模板量的不同直1653接导致扩增后的量的差别,那么看家基因的作用就出现了,要在看家基因的表达水平相同的情况下,比较其他基因的表达是否有升高或降低。

real time PCR看家基因的选择重要吗 非常重要,因为根据原理,RT-PCR是假设看家基因的表达恒定从而得出目标基因的相对含量所以,必须要确保看家基因本身不会受到实验条件的影响,即看家基因在对照组与实验组具有相同的表达量请仔细阅读原始文献Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T))Method

RT-PCR 看家基因(HGAPDH)循环数问题 RT-PCR看家基因(HGAPDH)循环数问题最近一直在做RT-PCR用的看家基因是HGAPDH。但做出来的CYCLENUMBER数值总是出现波动,有时候是14?

荧光定量PCR的内参和目的基因一定要放一起吗 荧光定量PCR的内参和目的基因一定要放一起内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因,又叫看家基因,比如常用的GAPDH,actin。或者18s rRNA也可以。如果内参表达量。

看家基因GAPDH作为引物进行PCR,电泳检测有两条带,杂带大致出现在400bp,请问是咋回事!

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