ZKX's LAB

看家基因荧光定量 我想问一下荧光定量PCR法用2-△△Ct计算相对定量的问题

2020-08-12知识23

实时定量数据处理时对照组的基因相对表达量怎么计算? 如何通过荧光定量目的基因和GAPDH计算相对表达量内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因,又叫看家基因,比如常用的GAPDH,actin。或者18s rRNA也可以。如果内参表达量一致,说明你PCR的上样量一致,样本的质量也一致。如果出入很大,说明你的样本的浓度或者是质量有问题。测到的目的基因的表达量就不可靠了管家基因是用来定量的。用来计算相对表达量。管家基因在相同量样品中的表达量我们认为是一致的。然后根据这个量来计算你的基因在不同样品中的表达量。所以每一个都需要单独的样品。基因组干扰需要你在提取RNA以后用DNase处理样品。如果不放心,可以拿处理过的RNA做膜版,跑一次,如果有带就是有污染,如果没有可以合成cDNA库了。实施定量PCR扩管家基因失败,为什么? 博凌科为-为你解答:荧光摄取的温度是否正确?应该在溶解曲线峰的前面的温度收集看家基因作用是什么?实时荧光定量PCR技术中为什么要用它? 看家基因的意思是稳定表达的一种基因 所以他的作用就是用来做内参 比如在做PCR的时候,初始的模板量的不同直接导致扩增后的量的差别,那么看家基因的作用就出现了,要在。我想问一下荧光定量PCR法用2-△△Ct计算相对定量的问题 做了一个实验,内部参考电压可以得到几个CT值,会得到多个目标基因。在这种情况下,根据CT值的平均值,将得到的比率(相对量)。实验肯定不是唯一的一次,至少重复3次。这将是一个倍数的3个或更多,得到。3个以上的值,你可以计算平均值和标准偏差的。看家基因作用是什么?实时荧光定量PCR技术中为什么要用它? 看家基因的意思是稳定表达的一种基因所以他的作用就是用来做内参比如在做PCR的时候,初始的模板量的不同直接导致扩增后的量的差别,那么看家基因的作用就出现了,要在看家基因的表达水平相同的情况下,比较其他基因的表达是否有升高或降低。荧光定量分析方法在哪些生物知识的网站可以查到 荧光定量分析方法 我们在设计实验的时候通常对下列事情更感兴趣:1)测定未知样品的绝对量:如给定的血样中的病毒颗粒数,食品中某一种转基因成分的含量;2)未知样品与已知。

#基因合成#定量pcr#pcr#荧光定量pcr

随机阅读

qrcode
访问手机版