培养基无菌生长试验 在无菌操作室，做实验，无论我怎么注意，空白培养基为什么总是会有细菌生长呢？

FDA无菌试验用什么培养基？ 是用的TSB吗？ 胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB)：胰蛋白胨 1.5%（g/100ml）大豆蛋白胨 0本培养基营养丰富，对某些较难生长的细菌均能生长，可用于各种细菌的增殖培养在无菌操作室，做实验，无论我怎么注意，空白培养基为什么总是会有细菌生长呢？ 肯定还是有污染，仔细寻找原因，看看是培养基灭菌不彻底（可用一小锥形瓶装同样培养基同批次灭菌后不开封看看情况怎样），还是倒平板时操作不规范。无菌检测用培养基主要有哪里类 无菌检查法常用培养基以及配制方法：（仅供参考）1.硫乙醇酸盐流体培养基酪胨(胰酶水解)15.0g 酵母浸出粉 5.0g葡萄糖 5.0g 氯化钠 2.5gL-胱氨酸 0.5g 新配制的 0.1%刃天青溶液 1.0ml硫乙醇酸钠 0.5g 琼脂 0.75g(或硫乙醇酸)（0.3 ml)纯化水 1000ml除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节 pH 为弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节 pH 值使灭菌后为 7.1±0.2。分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的 1/2。灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的 1/5，否则，须经 100℃水浴加热至粉红色消失（不超过 20 分钟），迅速冷却，只限加热一次，并防止被污染。除另有规定外，硫乙醇酸盐流体培养基置 30～35℃培养。2.胰酪大豆胨液体培养基胰酪胨 17.0g 氯化钠 5.0g大豆木瓜蛋白酶消化物 3.0g 磷酸氢二钾 2.5g葡萄糖（一水合/无水）2.5g（2.3g）纯化水 1000mL除葡萄糖外，取上述成分，混合，微温溶解，滤过，调节 pH 值使灭菌后在 25℃的 pH 值为7.3±0.2，加入葡萄糖，分装，灭菌。胰酪大豆胨液体培养基置 20～25℃培养。3.选择性。在开展无菌实验之前要对无菌室进行怎样的无菌处理 无菌室的无菌处2113理：1、先进行5261无菌室空间的消毒，开启紫外4102灯30-60分钟。2、检验用的1653有关器材，搬入无菌室前必须分别进会灭菌消毒。3、操作人员必须将手清洗消毒，穿戴好无菌工作衣、帽和鞋，才能进入无菌室。4、进入无菌室后再一次消毒手部，然后才进行检验操作。5、无菌室应保持清洁整齐，室内仅存放必须的检验用具如酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环、玻璃铅笔等，不要放与检测无关的物品。6、室内检验用具及凳桌等保持固定位置，不随便移动。7、每2-3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作台、门、窗、桌、椅及地面，然后用3%石炭酸水溶液喷雾消毒空气，最后紫外灯杀菌半小时。8、定期检查室内空气无菌状况，细菌数应控制在10个以下，发现不符合要求时应立即彻底消毒灭菌。9、无菌室杀菌前应将所有物品置于操作之部位（待检物例外），然后打开紫外灯杀菌30分钟，时间一到，关闭紫外灯待用。无菌室无菌程度的测定方法：取普通肉汤琼脂平板、改良马丁培养基平板各3个（平板直径均9厘米），置无菌室各工作位置上，开盖曝露半小时，然后倒置进行培养，测细菌总数应置37℃温箱培养48小时；测霉菌数则应置27℃温箱培养5天。细菌、霉菌总数均不得超过10。已经灭菌的培养基如何进行无菌检查 一般灭完菌后将培养基放在30-37度的环境中培养一天，看其有没有长菌（液体看是否变浑浊e5a48de588b67a6431333431363666，固体看是否长菌落），即可知是否灭菌后为无菌。培养基配制完毕后，应立即灭菌，通常在高压蒸汽灭菌锅内，汽相120℃条件下，灭菌20分钟。也可采用间歇灭菌法进行灭菌，即将培养基煮沸10分钟，24小时后再煮沸20分钟，如此连续灭菌三次，即可达到完全灭菌的目的。经过灭菌的培养基应置于10℃下保存，特别是含有生长调节物质的培养基，在4～5℃低温下保存要更好些。扩展资料培养基在使用前通过高压或过滤灭菌，防止污染应该注意以下事项：（1）确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。（2）其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果；前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作（至少应在除菌后进行一次。在无菌操作室，做实验，无论我怎么注意，空白培养基为什么总是会有细菌生长呢？ 肯定还是有污染，仔细寻找原因，看看是培养基灭菌不彻底（可用一小锥形瓶装同样培养基同批次灭菌后不开封看看情况怎样），还是倒平板时操作不规范。做空白培养的目的就在于。无菌试验的培养基重量 培养基的包装上一般都有多少克可以配1升的量。一般100毫升，可以到5-6个培养皿的。你们的无菌实验，需要多少培养皿？然后才决定配多少配多少培养基的。

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