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k-b法试验注意事项

2021-04-28知识7

简述K-B纸片琼脂扩散法原理及影晌因素。 1、K-B纸片琼脂扩散法原理:K-B纸片扩散法是将含有定量抗菌药e69da5e887aa62616964757a686964616f31333337623533物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上,纸片中的药物在琼脂中扩散,随着扩散距离的增加抗菌药物的浓度呈对数减少,从而在纸片的周围形成一种浓度梯度。在药物扩散的同时,纸片周围抑菌浓度范围内的测试菌不能生长,而抑菌浓度范围外的菌株则继续生长,从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。不同抗菌药物抑菌圈的直径因受药物在琼脂中的扩散速率的影响而可能不同,抑菌圈的大小可反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关,即抑菌圈越大,MIC越小。2、K-B纸片琼脂扩散法影响因素:①培养基的种类进行细菌药敏试验所用的培养基种类较多,WHO要求统一使用Mueller Hinton(M-H)琼脂作为K-B纸片法药敏试验的常规用培养基,该培养基中含有的低量胸腺嘧啶或胸腺嘧啶核苷是与磺胺类药物和甲氧苄啶竞争的物质,若过量可能会逆转磺胺类和甲氧苄啶的抑菌效应,使得抑菌圈变小变模糊,甚至消失。②K-B纸片的药量和pH值用半饱和法制作的药敏纸片含药量一般为10μg,饱和法药敏纸片含药量为20μg。药敏纸片的pH值一般要求。

K-B药敏试验的注意事项主要有:(1)K-B法所用琼脂为标准的M-H琼脂,该琼脂具有以下几个特点:’琼脂成分以及 PH水平得到了严格的控制;M-H琼脂上同一抗菌药对同一株细菌的。

影响k-b法药敏试验的主要因素有哪些 药敏试验的结果受到诸多因素的影响,如培养基、试纸片以及菌液的浓度等。1、培养基细菌药32313133353236313431303231363533e58685e5aeb931333339663939敏试验所用的培养基种类较多,多数情况下,采用WHO组织统一要求的M-H培养基,这种培养基中含有的低胸腺嘧啶是与磺胺类药物竞争的物质,因此进行的药敏试验效果较好。此外,还有适量的Ca2+、Mg2+,在培养基中起到触媒的作用。但是,有些细菌对培养基中的成分有特殊的要求,特殊的菌要用特殊的培养基才能进行药敏试验。例如,流感嗜血杆菌的药敏试验培养基用HTM琼脂;淋球菌的药敏试验培养基用加5%羊血的巧克力M-H琼脂;肺炎链球菌的药敏实验用M-H琼脂加5%的脱纤维羊血培养基。培养基中还有适量的Ca2+、Mg2+,在培养基中起到溶酶的作用,其含量的变化,可影响氨基糖苷类和四环素对铜绿假单胞菌的试验结果,含量过高,抑菌圈会变小,含量过低,抑菌圈会大得不可接受。细菌药敏试验的培养基厚度大约为4mm,若培养基厚度大于4mm,会使细菌出现耐药;若小于4mm,本应耐药的易出现敏感。所以,试验时一定不要把药敏纸片放在中央部位,而应均匀地排布在平皿周围的培养基上。制作药敏试验的培养基用水,主要是Ca2+、Mg2+。

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