怎样筛选营养缺陷型菌株 营养缺陷型菌株坚定中生长谱法优点

微生物学的特点 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：仙人指路微生物的特征 1．体积小，面积大 微生物的个体极其微小，必须借助显微镜放大e799bee5baa6e4b893e5b19e31333433623764几倍、几百倍、上千倍，乃至数万倍才能看清。表示微生物大小的单位是微米（1米＝106微米）或纳米（1米＝109纳米）。用细菌中的杆菌为例可以形象地说明微生物个体的细小。杆菌的宽度是0.5微米，因此80个杆菌“肩并肩”地排列成横队，也只有一根头发丝的宽度。杆菌的长度约2微米，故1500个杆菌头尾衔接起来仅有一颗芝麻长。2．吸收多，转化快 由于微生物的比表面积大得惊人，所以与外界环境的接触面特别大，这非常有利于微生物通过体表吸收营养和排泄废物，就使它们的“胃口”十分庞大。而且，微生物的食谱又非常广泛，凡是动植物能利用的营养，微生物都能利用，大量的动植物不能利用的物质，甚至剧毒的物质，微生物照样可以视为美味佳肴。3．生长旺，繁殖快 微生物以惊人的速度“生儿育女”。例如大肠杆菌在合适的生长条件下，12.5-20分钟便可繁殖一代，每小时可分裂3次，由1个变成8个。每昼夜可繁殖72代，由1个细菌变成4722366500万亿个（重约4722吨）；经48小时后，则可产生2.2×1043个后代，如此多。蛋白的表达与纯化 蛋白表达纯化已2113经是非常经典简单的实验了，没5261有LSS说的那么4102吓人。说说我的蛋白表达纯化以及下面的单抗1653制作工作总体设计概要吧：1 首先要知道你要纯化蛋白的编码DNA序列，查阅相关文献，看目的基因在那些细胞或者组织中高表达，进而设计该基因的引物，扩增出目的DNA片段的ARF。这一布叫目的基因片段的获取2 构建表达载体：根据你获得的基因本身的特性确定原核或者真核载体中表达，这一步的主要问题就是构建带有目的基因的质粒，导入表达系统中。一般原核表达时间短，成本低，表达量大，常优先考虑；但是有些基因在E coli中就是表达不出，可能是密码子优化等出现问题，也或者是由于想纯化得到更好的活性蛋白的考虑（原核的蛋白折叠系统显然没有真核的好），有很多研究者选择在毕赤酵母中表达。（我手里就有相关资料，因为以前做过表达纯化及后来的单抗制备），这一步再强调一下，优化密码子对于蛋白的成功表达很重要3 载体构建好了，下面就是重组蛋白的表达了。这一过程涉及到用多少的诱导剂，诱导多少时间才能得到最多的蛋白的问题，即优化表达条件。就是在上述不同量诱导剂诱导条件下，取菌体上清（分泌型）或者破碎细胞（胞内表达的蛋白）电泳，。原生质体融合的步骤 原生质体融合的程序包括：①标记菌株的筛选；②原生质体的制备和再生（过程见8.1.1）；③原生质体的融合；④融合子遗传标记的筛选；⑤融合子的鉴定。8.2.2.1 标记菌株的。安全检查表法的优点 1.安全检查表能够事先编制，可以做到系统化、科学化，不漏掉任何可能导致事故的因素，为事故树的绘制和分析做好准备。2.可以根据现有的规章制度、法律、法规和标准规范等。试述用艾姆氏ames法检测致癌剂的理论依据方法概要和优点 理论依据：利用鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型菌株在基本培养基的平板上不能生长，如发生回复突变变成原养型后则能生长。方法概要：在含待测可疑“三致”物（例如黄曲霉。怎样筛选营养缺陷型菌株 在筛选营养缺陷型突变株的工作中，常用三种培养基：一是基本培养基，它是仅能满足微生物野生型菌株生长要求的培养基。第二种是完全培养基，它是能满足某微生物所有营养缺陷型菌株营养要求的天然或半合成培养基。第三种是补充培养基，凡是只能满足某种营养缺陷型生长需要的合成培养基，就称为补充培养基。1、用于诱发营养缺陷型的诱变剂有亚硝基胍，紫外线，亚硝酸等，其中亚硝基胍的诱发突变率极高，一般可达10%以上，另外，随着诱变剂量的提高突变频率也增加。2、在诱变之后存活的菌体中，存活的营养缺陷型菌株的数量很少，而野生型细胞却大量存在，所以常采用抗生素法和菌丝过滤法来筛选营养缺陷型菌株。3、经过第二步，野生型的细胞和营养缺陷型细胞数量比例发生很大变化，但是终究还是混合体，要设法把缺陷型菌株从群体分离检出，可用点植对照法，影印法，夹层法，限量补充培养法来分离。4、缺陷型菌株的鉴定，实际是测定营养缺陷型菌株所需的生长因子种类。鉴定的方法可分为两大类：一种方法是在一个平皿中加入一种营养物质以测定多株缺陷型菌株(10-50)对该生长因子的需求情况。第二种方法是在同一个平皿上测定一种缺陷型菌株对许多生长因子的需求情况，成为。理想的工业发酵菌种应具备什么条件？ 1.能在廉价原料制成的培知养基上生长，且生成的目的产物产量高、已与回收2.生长较快道，发酵周期短3.培养条件易于控制4.抗噬菌体及杂菌污染的能力强5.菌种不易变异退化，以保证发酵回生产和产品质量的稳定6.对放大设备的适应性强7.菌种不是病原菌，不产生任何答有害的生物活性物质和毒素。生长圈，抑制圈，透明圈，变色圈的原理是什么？在菌种选育方面的作用？ 2)变色圈法 将 指示剂 直接掺入固体培养基中，进行待筛选菌悬液的单 菌落 培养，或喷洒在已培养成分散单菌落的固体培养基表面，在菌落周围形成变色圈。。关于遗传微生物学 营养缺陷型突变菌株不能自己合成某种氨基酸或蛋白质，这样就不在培养基里加入这种氨基酸或蛋白质，菌株则不能生长，就算培养基里有这种营养物质，菌株生长也比正常菌株缓慢，孢子颜色灰白。依靠此原理可筛选营养缺陷型突变株。肺炎双球菌转化实验、同位素标记噬菌体实验、不详

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