正相色谱柱与反相色谱柱的区别 色谱柱的安装：1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配.为减少死体积，进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线，同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度.安装色谱柱之前，确认流路系统中的溶剂是否正常.对分析较复杂的样品建议安装保护柱.2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳的连接效果，应尽量使用与色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头，如原来的接头长期匹配其他类型的色谱柱，建议在连接新色谱柱前应检查匹配情况，避免造成色谱柱的损坏或因色谱柱不匹配造成的漏液.3、使用PEEK 材料的通用接头，只需用手拧紧不需要特定扳手，使用压力为5000psi；使用温度不得超过100℃.流动相平衡：1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡.流动相一定要使用色谱级别的溶剂.如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生.2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤，消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏.缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀.不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱，以免柱性能损坏（添加5％的有机溶剂冲洗色谱柱，同时可以达到对缓冲盐清洗的作用.还可以使色谱柱更容易平衡）.3。
液相色谱仪使用及工作原理。 工作原理：2113流动相通过输液泵5261流经进样阀，与样品溶液4102混合，流经色谱柱1653，在色谱柱中进行吸附、分离，最后每一组分分别经过检测器转变为电讯号，在色谱工作站上出现相应的样品峰。液相色谱的使用：首先对样品进行预处理，然后进样，进样完毕后，清洗进样口，每次分析结束后，清洗通道，最后关闭仪器。扩展资料：液相色谱所用基本概念：保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致，但由于在气相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同。此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气相色谱有一定的差别。主要有以下几力‘面：①操作条件及应用范围不同对于气相色谱，是加温操作。仅能分析在操作温度下能汽化而不分解的物质，对高沸点化合物、非挥发性物质、热不稳定化合物、离子型化合物及高聚物的分离、分析较为困难，致使其应用受到一定程度的限制，据统计只有大约20%的机物能用气相色谱分析。而液相色谱是常温操作，不受样品挥发度和热稳定性的限制，它非常适合相对分子量较大，难汽化，不易挥发。
气-液色谱法的分离原理 色谱的分离原理都是利用待测物质在流动相和固定相两相间的分配系数的不同而实现分离。对于气液色谱来说，分离原理是利用不来同物质在流动相以及固定液中的分配系数（溶解度）不同而实现分离；当流动自相流动时，流动相是溶解性相近的惰性气体，而固定相的溶解性随固定液的不同而不同，所以分配系数主要决定于固定液的性质。假设有A和B两种组分，A组分极性与固定液相似，则在相百同的时间内，A组分呆在固定液的时间要大于B组分，反过来说B组分呆在流动相的时间大于A组分；而流动相是流动的，所以B组分的流速大于A组分，首先流出色谱柱；而A组分后流出色谱柱。同时声明，组分在固定相间的分配是度一个平衡，任何一种组分都会在两相间来回运动，之所以说“A组分呆在固定液的时间要大于B组分”是一个统计学的概念。
