琼脂扩散试验中,抗原抗体两者需要适当的比例,才能形成沉淀线.我是中央孔加抗原,四周孔加血清,那么怎么掌握抗原抗体的比例呢? 一般Ag和Ab的量都是一样的,血清一般制备出来直接加就是了.加的量不能太多,一般在50ul,加太多就会溢出来,那样就会影响效果了.沉淀线的形成在前面条件符合的情况下取决于你血清里面是否形成Ab,且免疫效果的好坏都会影响Ab的浓度.另外在打孔后一定要把底封好,如果漏的也会影响效果.放入温箱时一定要装入湿盒,不然Ag和Ab的量本来就不多,一会儿就干了.在观察结果时也要仔细,最好用白色底子观察,其实有沉淀线也是不怎么明显的,那就要看眼力与经验了.
常用琼脂扩散试验的琼脂浓度为多少?1.材料和试剂(1)PH8.6,0.1M巴比妥—巴比妥钠缓冲液巴比妥钠 10.3 g巴比妥 1.84 g硫柳汞 100 mg(防腐剂)蒸馏水加热溶解并定容至。
双向琼脂扩散试验中,抗原或抗体浓度大于相应抗体或抗原时,沉淀线会出现何种现 可溶性抗原2113与相应抗体在半固体琼脂凝5261胶内扩散,二者相遇,4102在比例合适处形成白色沉淀。基本类型有1653单向扩散和双向扩散两种。双向琼脂扩散试验(Double immunodiffusion test)抗原和抗体加到琼脂板上相对应的孔中,两者各自向四周扩散,如两者相对应,浓度比例合适,则经一定时间后,在抗原、抗体孔之间出现清晰致密的白色沉淀线。每一抗原与其相对应抗体只能形成一条沉淀线,若同时含有若干对抗原抗体系统,因其扩散速度的不同,可在琼脂中出现多条沉淀线。且根据沉淀线融合情况,还可鉴定两种抗原是完全相同还是部分相同。所以,可用此法来分析和鉴定标本中多种抗原或抗体成份,并用以测定抗原或抗体的效价。生物帮那里有比较全面的生物产品和技术信息。我都是在那里查看资讯什么的。如果你有时间的话,可以去了解一下。【方法】1、用生理盐水配制1.0~1.5%琼脂,隔水煮沸使溶化,用吸管吸取3.5ml趁热浇于载玻片上,制成琼脂板。2、待琼脂凝固后,按右图用打 孔器打孔,并用针头挑去孔中琼脂(孔距为5mm)。3、在①孔中加正常人混合血清,在②孔中加小牛血清,③孔中加羊抗人全血清,注意不要溢出。4、将加好样品的琼脂板置于湿盒内,于37℃温箱内放置24。