大肠杆菌的检测方法 多管发酵法2113。多管发酵法是一种检5261测水体中大肠杆菌的传统方法,这种4102方法是在44.5℃的含有荧光底物的培1653养基上连续培养24h,而后能产生分解荧光底物—葡萄糖醛酸酶,从而释放出荧光产物,进而使培养基在紫外光照射下产生特征荧光。此方法可被用来对原样品中的菌落数作统计学估计。在单料或双料乳糖胆盐发酵管内发酵,分离培养试验,利用伊红美蓝培养皿分离,接着是在乳糖发酵管中进行二次发酵,最后通过芽孢染色、革兰氏染色、显微镜观察等来完成。多管发酵法对试验条件要求不高,成本低,但是检测时间较长,容易受其他条件干扰,进而影响到测定结果的精确度。扩展资料:注意事项:1、检样时注意无菌操作。2、稀释时采用的稀释液可以用磷酸盐缓冲液或生理盐水,接种时可采用九管法,设置三个梯度,分别为0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL,每一个稀释度的试管应充分混匀。3、每次实验需要有阴性对照。4、使用小倒管培养基配制时,为排净气泡,灭菌时不要把试管的盖子盖的太紧,灭菌后注意观察一下倒管中的气体是否排完全、5、高压灭菌后等高压灭菌锅的压力表达到0,取出培养基放到冰箱冷却,效果会比较好。参考资料来源:-大肠杆菌测试片参考。尿标本什么情况下同时接种弱选择性培养基和血平板 还有不是这么接种的时候吗?我们都是接种麦康凯和血平板的。接种麦康凯可以用来鉴别是否阴性杆菌感染,其次常见的尿路感染菌—大肠杆菌在麦康凯上还能显红色或。痰培养样本要求是什么? 痰培养的采集及要求痰培养操作流程样本接收1、标本识别与病人基本信息2、申请单内容与标本类型核对3、标本外观与容器密闭性检查肉眼筛选1、合格标本(脓性):黄色、灰色、血性、铁锈色,浑浊、稠厚,呈现团块状的标本;2、不合格标本(唾液性):无色、白色、有黑色小点,清稀,呈现泡沫状,或者是有明显食物渣滓、纸屑灰尘、泥土的标本;3、混合性标本:既有脓性成分又有唾液成分的痰标本。镜下筛选混合性标本:1、先进行洗涤,分离出脓性成分,再镜检;2、脓细胞>;25个/HP且复层鳞状上皮个/LP的标本为合格标本,可进入下一步程序;而脓细胞个/HP或复层鳞上皮>;25个/LP的标本为不合格标本,应拒收。儿科痰标本:直接镜检做细胞学筛查。显微镜检验镜检原理:免疫学原理镜检方法:先低倍镜再油镜,收寻20~30个视野中脓细胞聚集处,集中而不稠密,且周围无鳞状上皮细胞或无大量成团状分布的细菌球的区域为读片区。镜检内容:认真收寻脓细胞胞浆中有无吞噬的细菌,或者结节状脓细胞团块中有无菌丝的包裹,记录细菌的染色排列特征,菌体特征(如粗细、长短、扭曲)。注意区分粘附与吞噬注意辨认经抗生素治疗后形态变异了的细菌(小球体、巨球体、丝状体、斑驳染色。血培养标本的采血时间和部位有什么要求? 二.采血时机1.尽可2113能在抗菌药物使用前5261;2.对已经使用抗菌药物的病人4102,最好在下次用药前1653采集;3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率;4.怀疑血流感染时应尽早采血,不要强调体温超过39℃才抽血,而错过时机。三、采集方法1.手卫生:洗手或手消毒。2.准备血培养瓶:根据检验申请单,选择合适的血培养瓶,血培养瓶外观和种类参照各公司提供的说明书,检查血培养瓶有无破损、保质期等,用75%酒精消毒血培养瓶塞,作用60s,待干。3.皮肤消毒:按常规消毒穿刺部位皮肤(用蘸有消毒液的棉签,以穿刺点为中心向外螺旋式消毒穿刺部位皮肤两遍,同时旋转棉签,保证穿刺点及周围皮肤无菌状态,防止皮肤寄生菌或环境引起的污染),消毒范围为8×10cm,待干。4.持穿刺针按常规方法刺入静脉,另一头刺入相应血培养瓶内,利用瓶内真空抽取血标本,如用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头直接注入血培养瓶。5.建议每套血培养同时接种至需氧瓶和厌氧瓶,有利于微需氧菌和厌氧菌的检出。当厌氧菌感染不能除外的病人,如腹部手术合并感染的病人,必须同时做厌氧菌血培养。如果不能满足推荐的采血量时,应首先满足需氧瓶;婴幼儿血培养一般只抽一瓶需氧瓶进行。细菌的接种与分离方法是什么? 细菌的接种与分离方法:1.平板划线分离法①连续划线分离法:主要用于杂菌不多的标本;②分区划线法:用于杂菌量较多的标本。2.斜面接种法主要用于单个菌落的纯培养、保存。
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