尿素对蛋白质变性作用及原理？ 有关尿素、盐酸胍等变性剂对蛋白质变性作用机理一直存在着争议，过去认为，尿素的结构与蛋白质的肽基团(Peptide groups)颇为相似，在与蛋白质形成氢键时既可作质子供体，又可作质子受体，它与蛋白质形成氢键能力比水强，能破坏蛋白质分子内部氢键而致蛋白质变性.但 Kamoun 在 TIBS(13卷11期p.424，1988年)的“教科书的错误”栏目里，写的一篇《尿素致球状蛋白质变性作用：是破坏氢键还是疏水键》一文，根据一些实验资料，建议在向学生介绍尿素的蛋白质变性机理是破坏蛋白质分子内部疏水键而致蛋白质变性
用大肠杆菌表达蛋白时，要确定是上清还是包涵体表达，为什么沉淀里的包涵体不需要用尿素溶解就可以跑电泳 1）你应该是2113没有明白什么5261是包涵体，简单的4102说就是翻译的蛋白没有正确折1653叠而聚版集在一起形成的，主权要的是疏水作用。实际上就是很多个蛋白分子，这些蛋白并不历闹是交联在一起的，用高浓度的尿素和盐酸胍可以使他们变性，解聚。2）用沉淀跑电泳可以确定目的蛋白是否在包涵体？包涵体是不溶于水的，比较总蛋白。沉淀，及上清中的诱导带就可以知道上清中有没有你想要的可溶蛋白了3）电泳检测的话，可以用SDS-PAGE检测，在上样之前，需要用上样缓冲液处理样品，处理后，包涵体也就慧烂姿解聚了，每个蛋白分子与SDS结合，形成了可溶物。4）质量大的话怎么可以用电泳来确定呢？为什么不可以呢？DNA电泳，蛋白电泳不前绝都可以吗？5）电泳的原理就是根据蛋白质量大小来将不同的蛋白分开的呀？不通种电泳的原理个不相同。SDS-PAGE可以简单的认为是根据蛋白质量来区分蛋白的。你想不明白应该是不知道什么是包涵体，或者什么是电泳，电泳的原理，你自己还是在网上好好看看这些内容，应该不难理解。上样缓冲液中有巯基乙醇，SDS，样品还要加热，破坏了包涵体之间蛋白的相互作用力，最好还是看看是怎么行成的包涵体吧
蛋白质沉淀了就变性了吗？用什么方法能让它溶解且有活性 ？ 用普通的盐不会变性只有加热，重金属盐，强酸强碱，各种射线才会变性沉淀不一定变性的
