高效液相是什么原理？ 高效液相的原理：液相色谱是一类分离与分析技术，其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中．为了区分各种方法，根据固定相的形式产生了各自的命名，如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。液相色谱是一类分离与分析技术，其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中．为了区分各种方法，根据固定相的形式产生了各自的命名，如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。分离后的样品是被分级收集后再进行分析的，使得经典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢，而且操作也比较复杂。直到20世纪60年代．发展出粒度小于10μm的高效固定相，并使用了高压输液泵和自动记录的检测器，克服了经典液相色谱的缺点，发展成高效液相色谱，也称为高压液相色谱。扩展资料：高效液相统称为高柱效、高压力、高效率的液相色谱。根据液相色谱原理，对物质进行分离。其原理可采用分配色谱，也可采用吸附色谱等等，其大体结构为：泵（用来输送流动相，即溶剂/洗脱液，A相一般为水溶性。
高效液相做含测，保留时间差别大 是不是同一个样品不同时间做出来的保留时间差别较大？保留时间影响因素比较多，如果已经确定pH值影响不大，可以从以下几个方面进行考虑：1.流动相的比例，最好保证有机相的比例一致，保存及超声脱气的时候用封口膜封一下，减少有机相挥发，也不要放置太长时间2.柱温是否恒定，柱温在一定程度上会影响保留值，最好设为定值，不要设为不控制3.色谱柱有没有更换，不同厂家的同一类型色谱柱由于填充技术、制备工艺的不同，在同样色谱条件下对同一组分的保留情况会有所不同，即使是同一厂家的也会有这种情况4.液相系统是否更换，不同的色谱仪的管路长短不同，会使走样时柱压不同，柱压也会影响出峰时间和峰形，原理类似于加压过柱5.如果是梯度洗脱，要保证平衡时间足够长，否则也会引起保留值改变
高效液相色谱法有哪些特点 1，为进行分离，可以根据2113样品的组分将流5261动相和固定相的组合最佳化。如果熟悉4102液相色谱，这1653是非常有利的，但对初学者来说，这是困难的。2，适用样品范围广，80%的分析对象可借此法分析。3，可以使用高效的分离柱，易于分离复杂的多组分混合物。4，把被分离的组分溶解在流动相中，可以全部回收之。5，可以使用多种非破坏性高灵敏度和选择性的检测器，把几种检测器串联起来，根据其对应特性，获取与定性有关的重要信息。6，只能检测从色谱柱流出的组分。7，由于没有通用型高灵敏度检测器，所以在分析未知混合物而没有色谱峰的时候，无法确定其原因是分离条件不合适，还是检测器没有响应。8，采用尺寸排斥色谱法时，从低分子到高分子的样品全部流出，而且流出顺序是从高分子量开始，故可根据保留容量推测分子量，最适于做未知样品的组成分析。9，测定精度好。因为注入精度比气相色谱好，故可以用绝对工作曲线。10，虽然示差折光检测器为通用型检测器，但和气相色谱的热导检测器和氢火焰检测器相比，由于化合物之间的响应不同，所以用峰面积百分数求由多种化合物组成的混合物时问题较多。11，要限制色谱柱的使用条件（温度、压力、流动相等）。而且与气相。
