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抑菌试验悬液法

2021-04-27知识8

抑菌试验中怎样制作符合要求的菌悬液? 操作步骤l.编号取无菌平皿9套,分别用记号笔标明10-1-10-9.另取6支盛有4.5mL无菌水的试管,依次标是10-1-10-9.2.稀释用lmL无菌吸管吸取lmL已充分混匀的大肠杆菌菌县液(待测样品),精确地放0.5mL至10-1的试管中,此即为10倍稀释.将多余的菌液放回原菌液中.将10-1试管置试管振荡器上振荡,使菌液充分混匀.另取一支lml吸管插入10 1试管中来回吹吸菌悬液三次,进一步将菌体分散、混匀.吹吸菌液时不要太猛太快,吸时吸管伸人管底,吹时离开液面,以免将吸管中的过滤棉花浸湿或使试管内液体外溢.用此吸管吸取10-1菌液lmL,精确地放0.5mL至10-2试管中,此即为100倍稀释.其余依次类推.放菌液时吸管尖不要碰到液面,即每一支吸管只能接触一个稀释度的菌悬液,否则稀释不精确,结果误差较大.3.取样用9支1mL无菌吸管分别吸取10-1至10-9的稀释菌悬液各lmL,对号放入编好号的无菌平皿中,每个平皿放0.2mL.不要用lmL吸管每次只靠吸管尖部吸0.2mL稀释菌液放入平皿臼,这样容易加大同一稀释度几个重复平板间的操作误差.4.倒平板尽快向上述盛有不同稀释度菌液的平皿中倒入融化后冷却至45℃左右的牛肉膏蛋白胨培养基约15mL/平皿,置水平位置迅速旋动平皿,使培养基与菌液混合均匀,而又不使培养基荡出。

做抑菌试验中用到的牛津杯具体的用法如何?求高人指点 操作方抄法是:将已灭菌的琼脂bai培养基加热到完全融化,倒在du培养皿内,每皿15ml(下层),待其凝zhi固。此外,将融化的培dao养基冷却到500C左右混入试验菌,将混有菌的培养基5 ml加到已凝固的培养基上待凝固(上层)。在培养基表面垂直放上牛津杯,在杯中加入待检样品,加满后在370C培养16~18小时。在培养中,一方面试验菌开始生长另一方面抗生素呈球面扩散,离杯越近,抗生素浓度越大,离杯越远抗生素浓度越小。随着抗生素浓度减小,有一条最低抑菌浓度带,在带范围内,菌不能生长,而呈透明的圆圈,这就叫“抑菌圈”。抗生素浓度越高,抑菌圈越大.

做微生物抑菌实验时,其中有一步骤是制备菌悬液,我稀释菌液10倍,100倍,1000倍等浓度梯度 做药敏试验所需菌悬液的浓度是0.5个麦氏比浊度.而这个浓度并不是通过血球计数板获得的,而是通过麦氏比浊管肉眼观或者比浊仪比出来的.0.5个麦氏比浊度大概就是淡淡的一点浑浊,这样描述可能你体会不出来,如果你亲自见.

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