PCR产物比目的条带大？？？？？？ 大很多吗？有时候电泳跑出来的带和MARKER对不上，但是送去测序的时候是没有问题的。要是你扩的很纯没杂带的话，干脆花几十块钱送去测序，反正现在测序也不贵。
如何确定pcr扩增产物分子量？其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物，需优化PCR条件。常用于PCR产物的标记，从而在短时间内获得我们所需的大量：-pcr，分子量，扩增。
PCR的问题 你可以做一个梯度PCR，用高保真酶.如果还是没有扩出来的，那可能就是你的药品问题了，buffer啊，dNTP啊，酶啊有问题、多试几次，相信会成功的另外有些步骤你参考下，看是不是控制条件上有点问题1.反应体系与反应条件标准的PCR反应体系：10×扩增缓冲液10ul4种dNTP混合物各200umol/L引物各10～100pmol模板DNA0.1～2ugTaqDNA聚合酶2.5uMg2+1.5mmol/L加双或三蒸水至100ulPCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+)2.工作步骤PCR反应的基本过程标准的PCR过程分为三步（：1.DNA变性（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA2.退火（复性）（40℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链.3.延伸（68℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右最佳的活性）的作用下，以dNTP为原料，从引物的5′端→3′端延伸，合成与模板互补的DNA链.每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量既增加一倍.现在有些PCR因为扩增区很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成，因此可以改为两步法，即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行，以减少一次升降温过程，提高了反应速度.
