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过氧化物酶染色四甲基联苯胺法的原理是什么? 四甲基联苯胺 危废名录

2021-04-27知识10

四甲基联苯胺血检原理 中文名称:32313133353236313431303231363533e58685e5aeb9313333396661333,3',5,5'-四甲基联苯胺英文名称:3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine英文别名:TMB;4,4'-Bi-2,6-xylidine;4,4'-Diamino-3,3',5,5'-tetramethylbiphenylCAS号:54827-17-7线性分子式:[-C6H2(CH3)2-4-NH2]2纯度:≥99.5%等级:BRMDL号:MFCD00007748Beilstein号:2808541EC号:259-364-63,3’5,5—四甲基联苯胺(简称TMB)是一种新型安全的色原试剂。与传统的色原试剂联苯胺,邻联甲苯胺及邻苯二胺等以上比较,TMB具有检测灵敏度高,稳定性好等优点,而且使用安全。经动物实验和Ames细菌自动变异性试验结果表明,TMB作为非致癌物和非致突变物。目前TMB已在逐步取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物,应用于临床化验,法医检测,刑事侦破及环境检测等领域。尤其是在临床生化检验方面,TMB作为过氧化酶的新底物,在酶免疫公析法(EIA)和酶联免疫吸附检验法(ELISA)获得了广泛应用。TMB主要应用项目如下:1、尿联试纸的配制 2、肝炎病毒的检测3、妊娠检测试验 4、血液和尿液中葡萄糖、血红蛋白、白蛋白的快速测定5、粪便隐血试验 6、血液中粒细胞值的检测7、类固醇、性。

四甲基联苯胺的特性 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)即TMB是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应,且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的、深兰色沉淀物,这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团。同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反应进行。

,3'5,5'-四甲基联苯胺比色法 方法提要在pH>;2的酸性溶液中,余氯与3,3',5,5'-四甲基联苯胺(以下简称四甲基联苯胺)反应,生成黄色的醌式化合32313133353236313431303231363533e4b893e5b19e31333433616235物,用目视比色法定量。本法检测下限为0.005mg/L余氯。含量>;0.12mg/L铁和0.05mg/L亚硝酸盐对本法有干扰。试剂氯化钾-盐酸缓冲溶液(pH2.2)称取3.7g经100~110℃干燥至恒量的KCl,用纯水溶解,再加0.56mLHCl,并用纯水稀释至1000mL。3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液(0.3g/L)称取0.03g3,3',5,5'-四甲基联苯胺(C16H2ON2),用100mL0.1mol/LHCl分批加入并搅拌使试剂溶解(必要时可加温助溶),混匀,此溶液应无色透明、贮存于棕色瓶中,在常温下可保存6个月。重铬酸钾-铬酸钾溶液称取0.1550g经120℃干燥至恒量的重铬酸钾(K2Cr2O7)及0.4650g经120℃干燥至恒量的铬酸钾(K2CrO4),溶于KCl-HCl缓冲溶液中,稀释至1000mL。此溶液生成的颜色相当于1mg/L余氯与四甲基联苯胺生成的颜色。EDTA二钠盐溶液(20g/L)。余氯标准系列(0.005~1.00mg/L)按表81.4所列用量分别吸取K2Cr2O7-K2CrO4溶液,注入50mL具塞比色管中,用KCl-HCl缓冲溶液稀释至50mL,在冷暗处保存可使用6个月。表81.4 0.005~1.0mg/L余氯标准。

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