如何构建稳定细胞株？ 构建方法：先把质粒整合到染色体上后，用相应的质粒DNA中的抗性标志来筛选该细胞系，就行成了稳定表达的细胞株。细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖。
真核细胞基因的转染方法步骤是什么？ 1．配置TBS-D溶液 1．配置TBS-D溶液 100mlTBS加入20％葡萄糖溶液0.5ml，至终。真核细胞基因的转染方法，生物帮上面有的，探针检测试剂盒 http：//product.bio1000.com/100045/
RAW264.7细胞转染详细点的注意事项及操作步骤 1.细胞接种：一般做转染前一天接种/铺板（细胞计数大约5*10^4cell/ml），使做转染前细胞密度在30-50%。2.为了能在使用时有较好的转染效果，第一次使用建议您用24孔板做，每孔2ul转染试剂即可。将最佳转染条件（siRNA与转染试剂的用量、比例）放大到对应的孔板即可。3.设置siRNA终浓度10nM，30nM，50nM，100nM四个梯度，每个梯度最好做2-3个复孔（至少2个复孔，避免实验误差）。4.用来稀释siRNA和Rfect的培养基必须是无血清培养基，因为血清的存在会干扰siRNA与转染试剂的混合，并且影响转染效率。5.检测方法：转染后48h收细胞做qPCR基因水平检测或者转染后72h收细胞提蛋白做western Blotting蛋白水平检测。
