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做MTT时,96孔培养板细胞浓度该是多少 悬浮细胞96孔板的接种密度

2021-04-27知识5

请问细胞培养到多大密度就可以接种到六孔板上了? 生长速度非常快的癌细胞,48孔板长满即可接种到6孔板了,其他生长速度较慢的有限细胞系,则要24孔板或12孔板长满才能接种到6孔板。

96孔细胞培养板的平底和圆底培养板的区别和选择 96孔细胞培养板平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择:贴壁细胞一般用平底培养板。悬浮型细胞的培养一般用V型。U型培养板亦多用于培养悬浮型细胞。V型培养板有时用做免疫学血凝集的实验。不同型状的板子自然有不同用途。平底的什么类型的细胞都可用﹐但当细胞数目较少﹐如做克隆时﹐就用96孔细胞培养板﹐另外﹐做MTT等实验时﹐无论贴壁和悬浮细胞﹐一般均用平底板。至于U或V型板﹐一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面﹐当做两种不同淋巴细胞混合培养时﹐需要二者相互接触以刺激﹐因此﹐一般需要U型板﹐因细胞会由于重力的作用而聚集在一个很小的范围内。V型板的用途更少﹐一般用于细胞杀伤实验时﹐为了使效靶细胞紧密接触﹐常使用V型板﹐但这种试验也可用U型板替代(加入细胞后﹐低速离心)如果是养细胞的话,通常是选用平底的,另外要特别注意材质,标示\"TissueCulture(TC)Treated\"就是养细胞用的。圆底的好像没听说过拿来养细胞。圆底的通常是拿来做分析,化学反应,或是保存样品用的,因为圆底比较好将液体吸得干净,如果用平底的就不好吸了。不过,如果你是要测吸光值的话,一定要买平底的才行。大部分细胞培养都用平底培养板,便于镜下观测、有明确。

如何把六孔板细胞铺的均匀 6孔板,采用2113将第一个孔加入少量5261无血清培养4102基,晃动浸润整个1653孔底,然后用移液枪专吸至第二孔属,同样方法浸润孔底,其它孔一次类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底,加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多,而加在周边晃匀后周边细胞多中间少的现象,细胞分散较均匀,注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢,但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式,但力度没有96孔板好掌握,效果没有96孔板好,所以我放弃改用浸润孔底的方法。2、细胞悬液加完后,将细胞培养板抬高,对着灯光,从底部往上看,看细胞有没有抱团。然后从底部敲击,使之分散。3、如果实验室有平板振荡器的话,我建议用这个仪器稍振荡一下,效果不错,就是振幅小,频率高的那种。4、细胞要尽量打散,大部分呈单个状态。离心后,要充分悬浮!还有转移到六孔板后,是要晃得!晃的时候最好不要让那个细胞液转圈,不然细胞就全被带到中间去了,就会不均匀!

#悬浮细胞96孔板的接种密度

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