如何测试细胞中的自由基比如H2O2，OH 为什么利用EPR测不出芬顿反应中的羟基自由基机体在代谢过程中产生多种自由基包括超氧阴离子自由基（O-2·）、羟自由基（·OH）及其活性衍生物H2O2等，其中以·OH化学性质最活泼。一定数量的氧自由基可为机体所用，但过多的氧自由基将作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，造成细胞结构和功能受损，进而导致体内代谢紊乱引起疾病〔1～4〕。因此，自由基清除剂的合成及寻找成为当前医研究的主要方向之一，而中的天然、丰富及低毒更受人们的青睐。目前人们测定自由基清除剂清除羟自由基的方法有很多，其中邻二氮菲-Fe2+氧化法操作简单，设备要求不高，易于推广和应用
如何测量羟基自由基 1、自旋捕捉—ESR法电子自旋共振法(ESR，Electron Spin Resonance)也称为电子顺磁共振(EPR，Electron Paramagnetic Resonance)，是一种能直接检测和辨认自由基的方法，其测定过程需与被测自由基的产生同步进行，故对样品的制备及检测操作有很大的限制。自旋捕捉技术(Spin Trapping)利用适当的自旋捕捉剂与活泼的短寿命自由基结合，生成相对稳定的自旋加合物，根据自旋加合物的ESR谱图波谱参数，可推断原来活泼自由基的结构等。2、高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC，High Performance Liquid Chromatography)可用于间接测定自由基。测定过程中必须先选择合适的化合物捕集被测体系中的自由基，使之生成具有一定稳定性，且能被液相色谱分离与检测的产物，然后用HPLC进行测定。2.1、采用二甲基亚砜捕集羟基自由基的HPLC测定方法。2.2、采用水杨酸捕集羟基自由基的HPLC测定方法3、分光光度法在难以采用ESR、HPLC等测试手段的情况下，用分光光度法测定HO·被认为是简便实用的方法。由于HO·本身不能由分光光度法检测，因此需先选择合适的化合物与HO·反应，生成在紫外—可见光区内能产生特征吸收的产物。4、荧光分析法
什么是单线态氧？ 单线态氧指单态氧单态氧（Singlet oxygen，1O2）是分子氧的顺磁性状态的一种通称，属于活性氧（reactive oxygen），是普通氧（3O2）的激发态32313133353236313431303231363533e78988e69d8331333431363664。单线态氧属于活性氧（reactive oxygen），是普通氧（3O2）的激发态。总自旋为零，无顺磁性。单线态氧虽不是自由基，但因解除了自旋限制所以反应活性远比普通氧高。1O2在许多自由基反应中可以形成。扩展资料：体内正常代谢可以产生活性氧。线粒体是活性氧的一个重要来源，活性氧族如超氧阴离子自由基（O2-·）、过氧化氢（H2O2）、羟自由基（OH·）和单线态氧都是有氧代谢的副产物。在大多数细胞中超过90%的氧是在线粒体中消耗的，其中2%的氧在线粒体内膜和基质中被转变成为氧自由基。体内的活性氧并不总是有害的，它对机体也有有利的一面。例如，机体内吞噬细胞在细胞膜受到刺激时，通过呼吸暴发机制，产生大量活性氧（reactive oxygen species，ROS），ROS 是吞噬细胞发挥吞噬和杀伤作用的主要介质。但是在病理条件下，由于活性氧的产生和清除失去了正常平衡，常常会造成活性氧对人体的损伤。参考资料来源：-活性氧参考资料来源：-单线态氧
