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什么是细胞化学法,在酸碱性蛋白染色中有什么应用 细胞内的碱性蛋白质

2020-07-19知识12

细胞内酸性蛋白和碱性蛋白显示实验的几个问题 染色要有细胞核,成熟哺乳动物体内血液没有细胞核,两栖动物和鸟类都可以做实验.蛋白质的基本组成单位是氨基酸,它们同时具有氨基和羧基(在溶液中主要以—NH3+,—COO—式存在),而自由氨基和羧基的游离取决于溶液的pH值.如何从细胞中提取蛋白质 (一)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利于蛋白质的溶解.提取的温度要视有效成份性质而定.一方面,多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大,因此,温度高利于溶解,缩短提取时间.但另一方面,温度升高会使蛋白质变性失活,因此,基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温(5度以下)操作.为了避免蛋白质提以过程中的降解,可加入蛋白水解酶抑制剂(如二异丙基氟磷酸,碘乙酸等).下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择.1、pH值蛋白质,酶是具有等电点的两性电解质,提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH 范围内.用稀酸或稀碱提取时,应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化,从而导致蛋白质构象的不可逆变化,一般来说,碱性蛋白质用偏酸性的提取液提取,而酸性蛋白质用偏碱性的提取液.2、盐浓度稀浓度可促进蛋白质的溶,称为盐溶作用.同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合,具有保护蛋白质不易变性的优点,因此在提取液中加入少量NaCl等中性盐,一般以0.15摩尔.升浓度为宜.缓冲液常采用0.02-0.05M磷酸盐和碳酸盐等渗盐溶液.(二)有机溶剂提取法一些和脂。请问,为什么酸性蛋白质分布于核仁和细胞质,而碱性蛋白质只分布于核仁? 没有这种绝对的说法哈~我想你说的应该是细胞核内碱性蛋白质和酸性蛋白质的分布.咱们知道细胞核内最重要的物质是DNA,而DNA的组成部分中有磷酸(碱基包裹在双链的内部,磷酸和核糖在外面),磷酸基团带负电荷,这样就很容.什么是细胞化学法,在酸碱性蛋白染色中有什么应用 细胞化学是研究细胞的化学成分,在不破坏细胞形态结构的状况下,用生化的和物理的技术对各种组分做定量的分析,研究其动态变化,了解细胞代谢过程中各种细胞组分的作用,是在细胞活动中的变化和定位的学科。用于细胞化学研究的染料可以是碱性的也可以是酸性的。酸性染料的生色基团是硝基和醌基;碱性染料的生色基团,包括着偶氮基吲胺基。染色的原理是基于在酸性染料中具有染色作用的阴离子和细胞内的碱性物质相结合,而碱性染料中的阳离子和细胞内的酸性物质相结合,所以酸性的细胞成分被碱性染料所染色,而碱性的细胞组分则被酸性染料染色细胞内酸性蛋白和碱性蛋白显示实验的几个问题 染色要有细胞核,成熟哺乳动物体内血液没有细胞核,两栖动物和鸟类都可以做实验。蛋白质的基本组成单位是氨基酸,它们同时具有氨基和羧基(在溶液中主要以—NH3+,—COO—式存在),而自由氨基和羧基的游离取决于溶液的pH值,当蛋白质处于酸性溶液时,由于该溶液中正离(OH—)多,从而抑制蛋白质中的COOH电离,于是造成蛋白质带正电荷多;当蛋白质处于碱性溶液时,由于该溶液中负离子(OH—)多,从而促使蛋白质中的COOH都电离成COO—,于是造成蛋白质带负电荷多;当蛋白质处于某一种pH溶液时,它恰好带有相等的正负电荷(呈兼性离子)。此时的pH值称为等电点(pL),由于蛋白质除了末端氨基和末端羧基之外,还具有许多侧链,其上的许多基团在溶液中也都可以电离,因此,一个蛋白质分子表面四周都有电荷。不同蛋白质分子所带有的碱性基团和酸性基团的数量不等,故它们的等电点也不一样。因此蛋白质分子所带的净电荷取决于:(1)分子中碱性基团和酸性基团含量。(2)所处溶液的pH值,如在生理条件下,整个蛋白质带负电荷多。为酸性蛋白质(等电点偏向酸性);带正电荷多,为碱性蛋白质(等电点偏向碱性)。据此,可将标本经三氯醋酸处理后,用不同pH的固绿染液(一种弱酸性染料,本身带。细胞结构中最重要的是细胞核. (1)染色体是细胞核内易被碱性染料染成深色的物质,由蛋白质和DNA组成,是遗传物质基因的载体;图中的①②,是一对染色体.(2)通过分析可知,一对基因中一个是显性基因,一个是隐性基因,那么生物表现出来的性状.绘图表示细胞中酸性蛋白质与碱性蛋白质的分布 通过红蓝铅笔,酸性用红的碱性用蓝的

#等电点#蛋白质#蛋白质结构#细胞核

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