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四甲基联苯胺跟醛基反应 试述什么是细胞化学染色,说明其基本步骤,并指出在临床中有哪些应用?

2021-04-27知识4

TLC显色剂配比方法? 显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。显色剂种类繁多,本章只能列举一些常用的显色剂。。

HRP(辣根过氧化物酶)标记抗体的原理及操作流程是什么 具体怎么弄 HRP标记抗体的方2113法:根据酶的结构不同5261可采用不同的方法。对于4102制备HRP结合物,可用戊二醛二步法和1653过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。戊二醛二步法原理:戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。在不断搅拌下,每升滤液中慢慢加入226克硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度),大约在1~2小时内加完,置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出,下面浑浊液以3000转/分离心15分钟,弃沉淀,合并上清液。再按每升上清液加258克硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌,当硫酸铵全部溶解后,置冷室过夜。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰冻离心机中以13000转/分离心20分钟,弃去上清液,收集沉淀。扩展资料:1、8 mg 辣根过氧化物酶放入1 ml玻璃瓶,加入1 ml双蒸水溶解,液体呈棕色。2、放入一个磁力搅拌子,电磁搅拌同时逐滴缓缓加入新配制的 NaIO4 0.2 ml,室温下继续搅拌40 min,液体呈现草绿色。3、将全部溶液用滴管装入反复用去离子水冲洗的透析袋中,4 oC 对1 mM pH 4.4的NaAc透析过夜,中间换液3-4次,每次300 ml,溶液最终呈浅棕色。4、按照酶:抗体=1:1的比例准备。

试述什么是细胞化学染色,说明其基本步骤,并指出在临床中有哪些应用? 细胞化学染色是细胞学和化学相结合而形成的一门学科,它以细胞形念学为基础,结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学物质做定性定位和半定量分析的方法.一)固定固定有物理法与化学法,物理法为干燥和火焰固定,化学法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。(二)显示1、偶氮偶联法:利用人工合成的酶底物,在酶作用下,产生分解产物,再与重氮盐结合引起偶氮偶联,使其形成不溶性的偶氮色素,以此证明酶的存在。2、联苯胺法:粒细胞和单核细胞中的过氧化物酶作用于过氧化氢,释放新生态氧,使无色的联苯胺形成蓝色沉淀。3、普鲁士蓝法:细胞内、外铁与酸性亚铁氰化钾作用,形成蓝色亚铁氰化铁沉淀。细胞化学染色图册4、雪夫反应:过碘酸氧化细胞内糖类中乙二醇基形成乙醛基,醛基与雪夫试剂作用,使无色品红形成红色沉淀。5、金属沉着法:其他尚有物理学方法,如脂溶性染料染色(显示脂质)、荧光显示、放射自显影以及体外活体染色亦常用于临床血液细胞学诊断。(三)细胞化学定量粗略估量,以染色反的强弱,受色的深浅,人为地区别为阴性和各种程度的阳性。百分法,只能反映细胞阳性率,不能反映受色强弱。积分法,是常用的半定量法,将等级估量与百分率。

#四甲基联苯胺跟醛基反应

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