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dna聚合酶1活性中心 分子生物学

2021-04-27知识1

关于DNA外切酶具有核酸外切酶活性的相关概念 DNA聚合酶具有两种活性,一个是聚合酶活性,5’—3’,意思是说在合成的单链或者引物链的3’加上与模板链互补的脱氧核苷酸此外,DNA聚合酶还有一个外切酶活性位点,用来校正剪切掉错误的脱氧核苷酸.这个活性是3’—5’方向,所以可以将新链3’端的错误配对脱氧核苷酸去掉.两个位点对于DNA的结合能力是不同的,正常情况(即配对正确)下,聚合酶位点的结合能力强,而外切酶位点结合能力弱,因此DNA聚合酶从5’向3’合成双链DNA;当合成时出现错配的情况,聚合酶位点与错配链的结合能力下降约100倍,而外切酶的结合能力不变,强于此时的聚合酶位点,所以DNA3’端移向外切酶位点,并剪切掉错误的配对;当错误配对被切掉后,相当于重新回到了正确配对的情况,故而聚合酶位点结合能力再次强于外切酶位点,DNA回到聚合酶位点,继续合成新链.这是由我们分子生物学的课程中学来的,我们使用的教材是《molecular biology of genes》,由发现DNA双螺旋的Waston主编如果你还是不懂,可以将邮箱发给我,我可以将我们上课的课件发给你

热稳定DNA聚合酶与DNA聚合酶有什么区别 最大的区别在2113于热稳定聚合酶5261耐高温,而dna聚合酶不耐高温,我们4102使用的BIOG Taq酶经1653过修饰,一般在95度加热5-10分钟活性中心才会暴露,才会产生聚合作用,这样就能有效避免低温下的模板错配,避免二聚体和非特异扩增。

DNA聚合酶具备几种活性?用途是什么? [1]聚合作用:在引物RNA'-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用.酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用.dNTP进入结合位点.

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