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培养的细胞在没有CO2情况下能挺多久 体外培养细胞接种密度

2021-04-27知识1

细胞接种量太少为什么细胞增殖缓慢 齐氏生物认为细胞自分泌的物质浓度减少,造成生长不良是细胞生长缓慢的原因之一。正常的培养细胞生长过程:潜伏期→指数增生期→停滞期在体外培养细胞中,细胞接种数对细胞的生长有影响,细胞培养专家齐氏生物 建议 适宜的接种密度,可以促使细胞增殖,接种密度太低或太高都不利于细胞的生长增殖。如果培养液与细胞的容积比例大于2000:1,生长物质弥散到细胞外的比例将是细胞内达到低于最小限度的浓度,此时细胞不能再增殖,培养液中的pH变碱,抑制细胞生长,细胞变圆不能贴壁,甚至引起细胞死亡等。如果接种密度太高,每个细胞周围培养液的容积降至0.007mm3以下,由于弥散率的降低,细胞内生物质的浓度增加,容易使排除物或其他代谢产物达到饱和,能量来源也很快耗尽,因此也会妨碍细胞的增殖。如何选择适宜的接种浓度要根据细胞的代谢和生长繁殖速度以及工作的需要而确定。一般来说,细胞代谢旺盛、生长速度快的细胞如肿瘤细胞,接种浓度宜偏低;而正常组织细胞生长较慢,代谢不够旺盛,接种浓度可偏高;如果是为了保种或不需急用,接种浓度可偏低些;有时为了便于观察细胞形态结构,接种浓度也可适当降低。希望能帮到你O(∩_∩)O

制取单克隆抗体时为什么要分别在体内和体外培养杂交瘤细胞? 为什么不是仅在体外培养,或是体内培养?( 杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内,在小鼠腹腔内生长杂交瘤,并产生腹水,因而可得到大量的腹水单抗且抗体浓度很高。体内培养,腹水中抗体含量浓度高,产量大,可持续抽取,不需要培养基等成本,不需要重复无菌操作,快速简便。体外培养,需要一整套组织培养技术条件,培养液中抗体含量不如腹水高,需要培养基等成本,操作步骤复杂产量低。体外培养方法制备的单抗量极为有限,无疑是不适用于单抗的大规模生产。要想在体外大量制备单抗,就必须进行杂交瘤细胞的大量(高密度)培养。单位体积内细胞数量越多,细胞存活时间越长,单抗的浓度就越高,产量就越大。外培养生产单抗的方法仍处在发展之中;随着研究的不断深入和技术的完善,它们将会在单抗生产的产业化进程中发挥越来越大的作用总之,最终获取单抗采用体内培养的方法,根本的决定因素是腹水的抗体含量高。然而,两种培养方法,缺一不可。必须依靠体外培养扩增杂交瘤细胞后,再行体内培养。

培养的细胞在没有CO2情况下能挺多久 细胞生长受温度、渗透压等外界因素的影响。一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃。温度过高或过低都会影响到细胞的生长。细胞耐受低温的能力比抗热的能力强,在低温下,细胞的代谢活力及核分裂降低。温度不低于0℃时,虽影响细胞代谢,但并无伤害作用;把细胞置于25~35℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减缓;放在40℃数小时后,再置回37℃培养细胞仍能继续生长。但如果在40℃下暴露时间太长,对细胞生长不利,甚至变圆脱落于瓶壁。若温度过低,在降到冰点以下时,细胞因胞外水和胞质结冰而受损死亡。但若向培养液中加入甘油或二甲亚砜等保护剂,封入安瓿中后,置于液氮中,可起保护作用,此时细胞可耐受-70℃以下温度,能长期储存,解冻后细胞复苏,仍能继续生长增殖,细胞生物性状不受任何影响。此为保存细胞的主要手段。细胞在39~40℃培养1小时,能受到一定损伤,但仍有可能恢复,但不能忍受温度再升高2℃,持续数小时,即在41~42℃中培养1小时,细胞损伤严重,温度至43℃以上时细胞多数被杀死。高温主要引起酶的灭活、类脂质破坏,核分裂的破坏,产生凝固酶使细胞发生凝固,另外使蛋白质变性。因此,体外培养细胞时一定要避免高温。细胞在高渗。

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