ZKX's LAB

原代细胞中细胞接种的密度 细胞接种的密度与细胞生长曲线的测量结果之间有什么关系

2021-04-27知识2

为什么接种细胞量差一倍第二天的密度却差不多 细胞接种密度incxulum density接种的活细胭密度。它在很大程度上影响细胞生长和生存。当接种浓度较低时,细胞生长繁殖较慢,最终的细胞产量也低,尤其是贴壁动物细胞,当接种浓度低到某一临界值时,细胞甚至不会在介质面上扩展。不同的细胞株,合适的细胞接种密度不同。

体外培养的细胞,不论是原代细胞还是传代细胞 由体内直接取出组织或细胞进行培养叫原代培养.原代培养细胞离体时间短,性状与体内相似,适用于研究.一般说来,幼稚状态的组织和细胞,如:动物的胚胎、幼仔的脏器等更容易进行原代培养.体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续.培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养.细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同.在一代中,细胞培增3~6次.细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期.

细胞培养的具体步骤和要求以及注意事项 一、细2113胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴5261锅内不断摇动促进其4102融化。移人165315ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2的细胞培养箱中培养。二、细胞传代细胞密度达到80%~90%时.去培养基,10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人细胞培养箱3min。加人1ml DMEM完全培养基终止胰酶消化,转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘,转移至15ml离心管,2000rpmX2min,弃上清液。再加入10ml PBS(经高压灭菌,保存于40C),吹匀,吸取10微升进行计数,按照1×106/盘接种,在含5%CO2的细胞培养箱继续培养。三、细胞冻存细胞密度达到80%~90%时,去培养基,10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人细胞培养箱3min。加入lmlDMEM完全培养基终止胰酶消化,转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘,转移至15ml离心管,2000rpmX2min,弃上清液。加入lml冻存液(90%血清,10%DMSO),放入冻存盒内(盒内有异丙醇,以保证温度降低的速度),立即放入一80℃冰箱内。

#原代细胞中细胞接种的密度

随机阅读

qrcode
访问手机版