pcR扩增中第几轮能获得目的基因,为什么?主要分析过程!!要详细!!!急!!!! pcR扩增中第几轮能获得目的基因,为什么?主要分析过程!要详细!急!PCR扩增过程中产物是按2的n次方方式增加的。因而,只要知道你的起始模板量以及最终想得到的产物量,就。
pcR扩增中第几轮能获得目的基因,为什么?主要分析过程!!要详细!!!急!!!! 最快要等到2轮后。第一轮结束后,得到的目的片段都是一条长链(原始模板)、一条短链(新扩增获得)的结构;第二轮结束后,部分以短链作为模板获得的片段是目的片段
PcR为什么是第三轮才获得目的基因 原因如下:一般需要获得的基因是有一定长度的,而模板长度很长。设计的引物决定了扩增产物的长度。第一个循环,引物与模板互补,此时变成两个模板,但因为模板很长,没有什么终止扩增,所以第一个循环扩增出来的新片段很长很长。第二个循环以新的长片段为模板进行,但新片段的一端是引物开头的,所以第二个循环得到的片段就是我们需要的长度,但只是一条链,所以还不能分离出目的基因。第三个循环:当以第二个循环得到的新片段为模板时,因为这个片段的长度就是需要扩增的长度,所以当第三个循环完成时,这个片段是需要的长度,且是双链DNA,这就得到了需要的目的基因了。所以至少要3个循环才能分离出目的基因。扩展资料PCR的每个循环过程包括高温变性、低温退火、中温延伸三个不同的事件:①变性:加热使模板DNA在高温下(94℃左右)双链间的氢键断裂而形成两条单链;②退火;使溶液温度降至50~60℃,模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合;③延伸:溶液反应温度升至72℃,耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板,在引物的引导下,利用反应混合物中的4种脱氧核苷三磷酸(dNTP),按5'一3’方向复制出互补DNA。参考资料来源:—聚合酶链式反应