实验三_单向琼脂扩散实验 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:wurq369临床免疫学实验指导检验医学院免疫学教研室吴荣泉13036095326实验二、单向琼脂扩散试验【实验原理】将适量的抗体加入琼脂内制成免疫琼脂板,打孔,在孔中加入待测抗原,抗原可向四周呈辐射状扩散,当抗原,抗体在比例适宜时形成白色沉淀环.沉淀环直径与抗原含量成正比。用标准抗血清和已知浓度的抗原(或国际参考品)制成标准曲线。通过测定样品沉淀环直径大小,可从标准曲线中读出抗原的含量。本试验主要用于检测标本中各种Ig、补体的含量等,具有高灵敏性,高特异性特点。【实验目的与要求】掌握单向琼脂扩散试验的原理、操作方法、结果分析及临床应用【试剂与器材】1.2.3.4.5.6.羊抗人IgG血清(兔抗人血清,购买)标准参考血清(标准IgG质控物,购买)待检人血清(IgG—抗原)pH7.40.01MPBS缓冲液(或NS)琼脂粉(制备636f70797a686964616f313334336238301%免疫盐水琼脂液)载玻片、打孔器、37℃恒温箱、湿盒、可调微量加样器等用于制作标准曲线【操作注意事项】1.制备抗体琼脂板琼脂温度必须严格控制,温度太低琼脂会凝固,太高则会影响抗体的活性2.加样孔内的琼脂应挑干净,切不可损坏孔的边缘,确保每孔的液面基本。
请教做琼脂扩散实验的方法? 琼脂扩散试验(gel diffusion test)可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂凝胶内扩散,二者相遇,在比例合适处形成白色沉淀。基本类型有单向扩散和双向扩散两种。(一)双向。
Ascoli沉淀实验是怎样的? 沉淀反应(precipitation)一种血清学反应.可溶性抗原与相应抗体结合,在有适量电介质存在下,经过一定时间,形成肉眼可见的沉淀物.沉淀反应的抗原可以是多糖、蛋白质、类脂等.同相应抗体比较,抗原的分子小,单位体积内含有的抗原量多,做定量试验时,为了不使抗原过剩,应稀释抗原,并以抗原的稀释度作为沉淀反应的效价.习惯上将参与沉淀反应的抗原称为沉淀原,抗体称沉淀素.沉淀反应的实验方法大体可分为环状法、絮状法、琼脂扩散法三种基本类型.环状沉淀反应 又称环状试验.主要用于抗原的定性试验.用已知抗体来检测未知抗原.在小口径试管中先加入已知抗血清,然后将待检抗原小心地加在血清的表面,成为界面清晰的两层.数分钟后,两界面交界处出现白色沉淀环,为阳性反应.本试验常用做抗原定性,如炭疽的诊断(Ascoli氏试验)、鉴别血迹、媒介昆虫的嗜血性等.絮状沉淀反应 将抗原与相应抗体在试管内或凹玻片上混匀,如出现肉眼可见的絮状沉淀物,为阳性反应.如诊断梅毒的康氏反应(Kahntest).琼脂扩散试验 利用可溶性抗原与抗体在半固体琼脂内进行扩散,若抗原与抗体对应,并且比例适当,就会出现白色沉淀线,此为阳性反应.琼脂扩散试验可在试管内、平皿中以及玻片上的琼脂中进行.又可分为。