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sigma多聚赖氨酸 求细胞爬片时用多聚赖氨酸包被的步骤

2021-04-26知识4

求相关论文,药物对小鼠精子活性的影响 1 材料与方法1.1 实验材料雄性4~5周龄ICR小鼠80只,购自长春高新医学动物实验研究中心,合格证号:SCXK?(吉)2003?0004,平均体重28.5 g,饲养1周后用于实验。环磷酰胺(山西普德制药有限公司,批号:H14023686,0.2 g/支),白消安(Busulfan,B2635,10 g,Sigma,美国),二甲基亚砜(DMSO,天津基准化学试剂有限公司,500 ml),多聚赖氨酸(poly?L?lysine,福州迈新公司,编号:GLU?0040,8 ml,10×)。1.2 实验动物分组及给药方法实验动物按注射药物及给药方式不同分为4组,分别为:环磷酰胺组22只腹腔内单次注射环磷酰胺(200 mg/kg)、白消安组24只同法给白消安(40 mg/kg)、复合组20只同法给环磷酰胺(120 mg/kg)和白消安(20 mg/kg)、空白组14只给0.9%生理盐水。每只小鼠统一腹腔内单次给药0.5 ml。先将环磷酰胺和白消安配成母液:环磷酰胺0.2 g/支,每支加0.9%生理盐水5 ml完全溶解成浓度为40 mg/ml;白消安准确称取100 mg,充分溶解于DMSO 10 ml中成浓度为10 mg/ml,给药时根据体重计算每只小鼠给药量,并将母液稀释成相应浓度工作液,注射后常规饲养,并每天做好观察记录。1.3 精子涂片的制作及分析给药后第35天、45天和60天各组分别取5只小鼠20%乌拉坦7 ml/kg麻醉,取。

如何获得大鼠幼鼠或胚鼠的面神经运动神经元?.生意经求助 首先要确定面神经运动神经元存在的部位,即面神经运动核区,然后切取该部位脑组织,分离神经元再培养。神经元分离培养的方法可参考《眼视光学杂志》2008年1月10卷1期。.

求细胞爬片时用多聚赖氨酸包被的步骤 博凌科为生物科2113技-为你解答:用多聚5261赖氨酸包被可以减少细胞脱片,根据4102细胞类型而定,1653最好用之。以下是我作细胞爬片时步骤:(1)多聚赖氨酸(PLL):武汉博士德分装Sigma产品,10ml/瓶。4度存 放,有效期1年。博士德说明书明确指出:多聚赖氨酸一般用干净的塑料器皿,如塑料切片盒,塑料杯等稀释,而不能用玻璃 器皿稀释,以免影响效果;在1:10稀释液可以保存在4度里,三个月内仍然可以使用。因为多聚赖氨酸对细胞有一定毒性,所以在保证贴附的前提下,尽量使用低点儿的浓 度。(2)无菌处理:PLL不可以高温消毒,故应过滤除均,分装于无菌处理的细胞冻存管内,1ml/管,封口模密封,4度保存。另外,准备无菌去离子水 50ml。(3)配置工作液:用移液枪吸取0.3ml PLL+3ml 无菌去离子水,混匀放于10ml无菌塑料离心管中。封口模密封后4度存放。(4)玻片处理:常规处理的盖玻片,纱布夹心饼式消毒、保存。铺片于培养皿中,移液枪将PLL工作液滴加于玻片上,室温10分钟后,用消毒 好的纱布条吸取玻片上的PLL液。在超静台内风干后使用,或者超静台内过夜晾干,次日使用。(5)常规细胞消化,离心后爬片。如果既然细胞生长状态良好,染色时不掉片,可以不用。

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