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洗脱时间加死时间 为什么在洗脱样品时,流速不能太快或太慢

2021-04-26知识1

为了加速凝胶的膨胀,通常可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热,逐渐升温至接近沸腾,这样操作的优点不包括 B

在某色谱条件下,组分A在16min洗脱出来,组分B在25min洗脱出来,若死时间为3min,试计算:(1)B对A的相对保留值;(2)组分A、B在柱内的容量因子 不溶于固定相的物质C流出需2.0min,则色谱柱的死时间为2.0min.B组分相对于A的相对保留时间为(25-2)/(15-2)=1.77.容量因子(capacity factor,K)-化合物在两相间达到平衡时,在固定相与流动相中的量之比.K=(tR-t0)/t0=tR’/t0(或溶质在固定相中的量/溶质在流动相中的量).{K=Cs/Cm=K’Vm/Vs k=(tR-t0)/t0=K*Vs/Vm Vs:色谱柱中固定相的体积;Vm:色谱柱中流动相的体积.}由于你没有提供固定相和流动相体积的数据,这个我无从计算.还有你的第三个问题是什么呢?或者tA=15.0 min,tB=25.0 min,t0=tC=2.0 mintA?=tA-t0=13.0 min,tB?=tB-t0=23.0 min1)B组分相对于A的相对保留时间为γB,A=tB?/tA?=23.0/13.0=1.772)组分A在柱中的容量因子 k=tA?/t0=13.0/2.0=6.53)组分B流出柱子需25.0min,那么,B分子通过固定相的平均时间为25.0-2.0=23.0 min.

为什么在洗脱样品时,流速不能太快或太慢 这是凝胶过滤的.如果流速太快,分子小的物质来不及扩散,会随着分子大的物质一起被洗脱下来,达不到分离目的;如果流速太慢,大分子物质的下沉的速度与小分子差不多的话,同样达不到分离的目的.亲,我怎么感觉你是长医的O(∩_∩)O~

#洗脱时间加死时间

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